一种溪畔杜鹃的组培快繁方法与流程-尊龙凯时官方app下载

文档序号:36175267发布日期:2023-11-25 00:04阅读:37来源:国知局
一种溪畔杜鹃的组培快繁方法与流程

1.本发明涉及溪畔杜鹃的繁殖技术领域,特别涉及一种溪畔杜鹃的组培快繁方法



背景技术:

2.溪畔杜鹃
(rhododendron rivulare hand.-mazz.)
是杜鹃花科杜鹃花属常绿小乔木或灌木,高1~
3m。
叶呈卵状披针形或长圆状卵形,花冠呈漏斗形,淡白色具红色斑点,单株花期长达
30d
,单花序花朵数可达
18


溪畔杜鹃树形优美,花期长,是集观花

观叶

观形于一体的园林绿化新树种,具有较高的园艺价值

作为很好的园林景观树种,溪畔杜鹃存在自然杂交结实率低,种子小,播种成活困难,且种子繁殖苗生长缓慢等问题,从播种到开花至少需要3~4年,有的甚至8年以上,此外,其扦插苗存在成活难,长势慢,病虫害较多的问题

3.此外,溪畔杜鹃茎段外植体采自室外,密被短腺头毛,消毒较为困难,污染率较高

在选择外植体材料时,以带有侧芽的嫩茎段最多,但是幼嫩茎段受季节的限制

以种子为外植体时,外植体灭菌较容易,但后代存在分离现象,花蕾也受到季节的限制

以叶片为外植体虽然不受季节的限制,但密被腺头睫毛,灭菌比较困难



技术实现要素:

4.为了解决上述的技术问题,本发明的目的是以溪畔杜鹃茎段等外植体作为材料进行组培快繁研究,建立高效的栽培模式和管理技术,保留优良性状的同时,可有效解决现有的繁殖方法存在的受繁殖季节的影响大,繁殖速度慢的问题

5.为了实现上述目的,本发明采用的技术方案为:
6.一种溪畔杜鹃的组培快繁方法,其特征在于,包括以下步骤:
7.步骤1:截取新鲜的溪畔杜鹃茎段进行消毒,制得无菌外植体;
8.步骤2:将无菌外植体接到腋芽诱导培养基上,进行腋芽诱导培养,得到腋芽;
9.步骤3:将腋芽分别接到继代增殖培养基中进行继代增殖培养,继代培养后,各茎节处长出不定芽;
10.步骤4:将长出不定芽的茎节转接到壮苗培养基中进行壮苗培养,得到无菌苗;
11.步骤5:将无菌苗转接入生根诱导培养基中培养后,进行炼苗移栽;
12.所述步骤2中的腋芽诱导培养基为
wpm zt(1.0

3.0)mg
·
l-1
naa(0.1

1.0)mg
·
l-1

13.所述步骤3中的继代增殖培养基为
wpm zt(1.0

4.0)mg
·
l-1
ga3(0.0

1.0)mg
·
l-1
naa(0.05

0.50)mg
·
l-1

14.所述步骤4中的壮苗培养基为
wpm zt(0.1

1.0)mg
·
l-1
naa(0.1

0.5)mg
·
l-1

15.所述步骤5中的生根诱导培养基为
wpm
蔗糖
(15

25)g
·
l-1
naa(0.5

1.5)mg
·
l-1
iba(0.5

1.5)mg
·
l-1
ac(0.1

2.0)g
·
l-1

16.优选的,所述步骤1中用浓度为2%次氯酸钠进行消毒,消毒时间为
8-12min。
17.优选的,所述步骤2中的腋芽诱导培养周期为
20d。
18.优选的,所述步骤3中的继代增殖培养周期为
50d。
19.优选的,所述步骤4中的壮苗培养周期为
50d。
20.优选的,所述步骤5中的生根诱导培养周期为
60d。
21.优选的,所述步骤5中的炼苗移栽步骤具体为:将经过生根诱导培养基培养后的组培苗在室内炼苗5~
6d
,将炼苗后的组培苗取出,洗净根系的培养基,移栽于消毒过的基质上,将溪畔杜鹃移栽至土壤中,浇透水一次,每周浇一次水,进行常规管理

22.优选的,所述基质为泥炭土

珍珠岩

河沙按照质量
2﹕1﹕1
配比而成

23.优选的,所述步骤1~5中,培养温度为
23-27℃
,光照为
12h/d
,光照强度为
2000lx。
24.与现有技术相比,本发明的有益效果在于:
25.(1)
本发明通过溪畔杜鹃进行消毒

基础培养

增殖培养和生根培养等一系列工序,能够快速的获得大量的溪畔杜鹃组培苗,在消毒过程中,选用合适浓度的次氯酸钠作为消毒剂,有利于吸收和防止褐化

26.(2)
本发明以
wpm
为基本培养基时,培养效果显著高于其它培养基,对于腋芽萌发时间影响达到显著水平,对于生根诱导的影响达到显著水平

向其中添加了合适浓度的细胞分裂素
zt
和生长素
naa
,细胞分裂素
zt
与生长素
naa
协同作用,使丛生芽增殖速度加快,缩短增殖时间

在溪畔杜鹃的增殖培养中,
ga3搭配
zt
使用时,会有更好的增殖效果;在生根诱导中,适量的
ac
能促使瓶苗生根较多,生长迅速且繁茂

27.(3)
移栽时,基质中泥炭土

珍珠岩

河沙的比例为
2﹕1﹕1
,此时能够显著增加移栽成活率,泥炭土具有丰富的营养和良好的保水性;珍珠岩具有独特的毛细管作用,可提高基质的孔隙度,改善其通气

排水性,有利于氧气扩散;河沙颗粒较大
,
土壤中的空气含量较高
,
有利于植物的呼吸和生长

此外
,
河沙还可以增加土壤的稳定性
,
避免土壤流失

因此泥炭土

珍珠岩和河沙配合作用可以具有良好的生根效果,特别是显著促进根长的生长

附图说明
28.图1为本发明实施例1中腋芽诱导后的植物萌发效果图;
29.图2为本发明实施例1中继代增殖培养后的植物生长效果图;
30.图3为本发明实施例1中壮苗后的植物生长效果图;
31.图4为本发明实施例1中生根后的植物生根效果图

具体实施方式
32.实施例133.一种溪畔杜鹃组培快繁方法,该方法按如下步骤进行:
34.1、
培养基的配置:
35.(1)
腋芽诱导培养基配方为
wpm zt3.0mg
·
l-1
naa0.5mg
·
l-1

36.(2)
继代增殖培养基配方为
wpm zt2.0mg
·
l-1
zt ga30.1mg
·
l-1
naa0.1mg
·
l-1

37.(3)
壮苗培养基配方为
wpm zt0.5mg
·
l-1
naa0.5mg
·
l-1

38.(4)
生根诱导培养基配方为
wpm
蔗糖
20g
·
l-1 1
naa1.0mg
·
l-1
iba1.5mg
·
l-1
ac1.0g
·
l-1

66.一种溪畔杜鹃组培快繁方法,该方法按如下步骤进行:
67.1、
培养基的配置:
68.(1)
腋芽诱导培养基配方为
wpm zt1.0mg
·
l-1
naa0.1mg
·
l-1

69.(2)
继代增殖培养基配方为
wpm zt2.0mg
·
l-1
zt ga30.0mg
·
l-1
naa0.1mg
·
l-1

70.(3)
壮苗培养基配方为
wpm zt0.1mg
·
l-1
naa0.1mg
·
l-1

71.(4)
生根诱导培养基配方为
wpm
蔗糖
20g
·
l-1 1
naa0.1mg
·
l-1
iba1.0mg
·
l-1
ac2.0g
·
l-1

72.2、
溪畔杜鹃组培快繁方法
73.步骤1:截取新鲜的溪畔杜鹃茎段进行消毒,制得无菌外植体;
74.步骤2:将无菌外植体接到腋芽诱导培养基上,进行腋芽诱导培养,得到腋芽,培养
20d

75.步骤3:将腋芽分别接到继代增殖培养基中进行继代增殖培养,继代培养后,各茎节处长出不定芽
,
培养
50d

76.步骤4:将长出不定芽的茎节转接到壮苗培养基中进行壮苗培养,得到无菌苗,培养
50d

77.步骤5:将无菌苗转接入生根诱导培养基中,培养
60d
后,进行炼苗移栽;
78.所述步骤1中用浓度为2%次氯酸钠进行消毒,消毒时间为
10min。
79.所述步骤5中的炼苗移栽步骤具体为:将经过生根诱导培养基培养后的组培苗在室内炼苗
14d
,将炼苗后的组培苗取出,洗净根系的培养基,移栽于消毒过的基质上,将溪畔杜鹃移栽至土壤中,浇透水一次,每周浇一次水,进行常规管理

80.所述基质为泥炭土

珍珠岩

河沙按照质量
2﹕1﹕1
配比而成

81.步骤1~5中,培养温度为
23℃
,光照为
12h/d
,光照强度为
2000lx。
82.对比例183.一种溪畔杜鹃组培快繁方法,该方法按如下步骤进行:
84.1、
培养基的配置:
85.(1)
腋芽诱导培养基配方为
1/4ms
86. zt3.0mg
·
l-1
naa0.5mg
·
l-1

87.(2)
继代增殖培养基配方为
wpm zt0.5mg
·
l-1
ga30.1mg
·
l-1
naa0.1mg
·
l-1

88.(3)
壮苗培养基配方为
wpm zt0.5mg
·
l-1
naa0.0mg
·
l-1

89.(4)
生根诱导培养基配方为
1/2ms
蔗糖
20g
·
l-1 1
naa1.0mg
·
l-1
iba1.5mg
·
l-1
ac1.0g
·
l-1

90.2、
溪畔杜鹃组培快繁方法
91.步骤1:截取新鲜的溪畔杜鹃茎段进行消毒,制得无菌外植体;
92.步骤2:将无菌外植体接到腋芽诱导培养基上,进行腋芽诱导培养,得到腋芽,培养
20d

93.步骤3:将腋芽分别接到继代增殖培养基中进行继代增殖培养,继代培养后,各茎节处长出不定芽
,
培养
50d

94.步骤4:将长出不定芽的茎节转接到壮苗培养基中进行壮苗培养,得到无菌苗,培养
50d

95.步骤5:将无菌苗转接入生根诱导培养基中,培养
60d
后,进行炼苗移栽;
96.所述步骤1中用浓度为2%次氯酸钠进行消毒,消毒时间为
11min。
97.所述步骤5中的炼苗移栽步骤具体为:将经过生根诱导培养基培养后的组培苗在室内炼苗
14d
,将炼苗后的组培苗取出,洗净根系的培养基,移栽于消毒过的基质上,将溪畔杜鹃移栽至土壤中,浇透水一次,每周浇一次水,进行常规管理

98.所述基质为泥炭土

珍珠岩

河沙按照质量
2﹕1﹕1
配比而成

99.步骤1~5中,培养温度为
24℃
,光照为
12h/d
,光照强度为
2000lx。
100.本对比例和实施例1的区别在于,步骤2中,基本培养基为
1/4ms
培养基;步骤3中
,zt
的浓度为
0.5mg
·
l-1
;步骤4中,
naa
浓度为
0.00mg
·
l-1
;步骤5中,基本培养基为
1/2ms
培养基

101.对比例2102.一种溪畔杜鹃组培快繁方法,该方法按如下步骤进行:
103.1、
培养基的配置:
104.(1)
腋芽诱导培养基配方为
1/2ms zt3.0mg
·
l-1
naa0.5mg
·
l-1

105.(2)
继代增殖培养基配方为
wpm zt5.0mg
·
l-1
zt ga30.1mg
·
l-1
naa0.1mg
·
l-1

106.(3)
壮苗培养基配方为
wpm zt1.5mg
·
l-1
naa0.5mg
·
l-1

107.(4)
生根诱导培养基配方为
1/4ms
蔗糖
15g
·
l-1 1
naa1.5mg
·
l-1
iba0.5mg
·
l-1
ac2.0g
·
l-1

108.2、
溪畔杜鹃组培快繁方法
109.步骤1:截取新鲜的溪畔杜鹃茎段进行消毒,制得无菌外植体;
110.步骤2:将无菌外植体接到腋芽诱导培养基上,进行腋芽诱导培养,得到腋芽,培养
20d

111.步骤3:将腋芽分别接到继代增殖培养基中进行继代增殖培养,继代培养后,各茎节处长出不定芽
,
培养
50d

112.步骤4:将长出不定芽的茎节转接到壮苗培养基中进行壮苗培养,得到无菌苗,培养
50d

113.步骤5:将无菌苗转接入生根诱导培养基中,培养
60d
后,进行炼苗移栽;
114.所述步骤1中用浓度为2%次氯酸钠进行消毒,消毒时间为
12min。
115.所述步骤5中的炼苗移栽步骤具体为:将经过生根诱导培养基培养后的组培苗在室内炼苗
14d
,将炼苗后的组培苗取出,洗净根系的培养基,移栽于消毒过的基质上,将溪畔杜鹃移栽至土壤中,浇透水一次,每周浇一次水,进行常规管理

116.所述基质为泥炭土

珍珠岩

河沙按照质量
2﹕1﹕1
配比而成

117.步骤1~5中,培养温度为
26℃
,光照为
12h/d
,光照强度为
2000lx。
118.本对比例和实施例1的区别在于,步骤2中,基本培养基为
1/2ms
培养基;步骤3中,
zt
浓度为
5.0mg
·
l-1
;步骤4中,
zt
浓度为
1.5mg
·
l-1
;与实施例2区别在于,步骤5中,基本培养基为
1/4ms
培养基

119.对比例3120.一种溪畔杜鹃组培快繁方法,该方法按如下步骤进行:
121.1、
培养基的配置:
122.(1)
腋芽诱导培养基配方为
wpm zt0.5mg
·
l-1
naa0.5mg
·
l-1

123.(2)
继代增殖培养基配方为
wpm zt2.0mg
·
l-1
zt ga31.5mg
·
l-1
naa0.1mg
·
l-1

124.(3)
壮苗培养基配方为
wpm zt0.5mg
·
l-1
naa1.0mg
·
l-1

125.(4)
生根诱导培养基配方为
wpm
蔗糖
20g
·
l-1 1
naa1.0mg
·
l-1
iba1.5mg
·
l-1
ac0.0g
·
l-1

126.2、
溪畔杜鹃组培快繁方法
127.步骤1:截取新鲜的溪畔杜鹃茎段进行消毒,制得无菌外植体;
128.步骤2:将无菌外植体接到腋芽诱导培养基上,进行腋芽诱导培养,得到腋芽,培养
20d

129.步骤3:将腋芽分别接到继代增殖培养基中进行继代增殖培养,继代培养后,各茎节处长出不定芽
,
培养
50d

130.步骤4:将长出不定芽的茎节转接到壮苗培养基中进行壮苗培养,得到无菌苗,培养
50d

131.步骤5:将无菌苗转接入生根诱导培养基中,培养
60d
后,进行炼苗移栽;
132.所述步骤1中用浓度为2%次氯酸钠进行消毒,消毒时间为
12min。
133.所述步骤5中的炼苗移栽步骤具体为:将经过生根诱导培养基培养后的组培苗在室内炼苗
14d
,将炼苗后的组培苗取出,洗净根系的培养基,移栽于消毒过的基质上,将溪畔杜鹃移栽至土壤中,浇透水一次,每周浇一次水,进行常规管理

134.所述基质为泥炭土

珍珠岩

河沙按照质量
2﹕1﹕1
配比而成

135.步骤1~5中,培养温度为
23℃
,光照为
12h/d
,光照强度为
2000lx。
136.本对比例和实施例1的区别在于,步骤2中
zt
浓度为
0.5mg
·
l-1
;步骤3中,
ga3的浓度为
1.5mg
·
l-1
;步骤4中
naa
浓度为
1.0mg
·
l-1
;步骤5中,
ac
的浓度为
0.0mg
·
l-1

137.按照实施例
1-3
和对比例
1-3
的方法进行繁殖,并记录结果,具体试验结果见表1和表
2。
138.表1不同溪畔杜鹃腋芽诱导培养结果比较实验
[0139][0140]
该实验通过不同基本培养基和不同浓度的激素配比,寻找提高溪畔杜鹃腋芽的萌
发时间和萌发率及继代增殖的培养基配方;选择
zt、naa
两种生长素,筛选最佳腋芽的萌发时间和萌发率的腋芽诱导培养基配方

[0141]
从表1中可以看出,基本培养基以
wpm
培养基萌发率高于
1/4ms

1/2ms
培养基

因此,确定溪畔杜鹃的腋芽诱导培养基为
wpm zt3.0mg
·
l-1
naa0.5mg
·
l-1
,萌发时间最短且萌发率最高

[0142]
表2溪畔杜鹃增殖培养结果比较实验
[0143][0144][0145]
从表2可以看出,相同基本培养基情况下,每种组合对溪畔杜鹃的增殖都有效果,但随着植物生长调节剂浓度的不同,增殖效果也有着明显的差异

随着
zt
浓度的增加,增殖系数呈先上升后下降的趋势,当
zt
浓度为
2.0mg
·
l-1
时,增殖效果最佳,增殖系数最大为
9.11
,此时增殖苗长势良好,大部分生长健壮;随着
ga3浓度的增加,增殖系数相应的增大,但在
ga3为
1.0mg
·
l-1
以上时,增殖苗开始出现矮化,叶片老化的现象,而低浓度的
ga3搭配
zt
使用时,则会有更好的增殖效果

此外,高浓度的
zt
配合使用较低浓度的
naa
时,增殖苗出现主干纤细的情况

因此,本研究最适合溪畔杜鹃继代增殖培养的处理为
wpm zt2.0mg
·
l-1
ga30.1mg
·
l-1
naa0.1mg
·
l-1

[0146]
表3溪畔杜鹃壮苗培养结果比较实验
[0147][0148]
增殖培养所获得的丛生芽虽然数量多,但有部分相对矮小细弱,从而需要通过壮苗培养来提高这部分无菌苗的质量

[0149]
从表3中可知,随着
zt
浓度的增加,组培苗的生长情况得到改善,茎开始变粗,但在
1.0mg
·
l-1
时,组培苗开始出现增殖的情况


naa
浓度升高时,组培苗节间开始伸长,不添加
naa
时,组培苗节间不伸长

此外,当只添加
zt
时,叶片宽大,随着
naa
浓度的增加,两者浓度相差较大时,叶片变小

因此,本研究较为适合的壮苗培养基配方为
wpm zt0.5mg
·
l-1
naa0.5mg
·
l-1

[0150]
表4溪畔杜鹃生根诱导培养结果实验
[0151][0152]
从表4可知,基本培养基为
wpm
时,平均根数及生根率都比
1/2ms

1/4ms
培养基的高,生根效果较好

蔗糖在
20g
·
l-1

15g
·
l-1
的浓度时,对溪畔杜鹃的生根作用优于
25g
·
l-1

不添加
ac
时,组培苗生根率较低;添加
ac
后,生根效果显著,随着浓度的增加,生根率呈
先升后降的趋势


ac

1.0g
·
l-1
时,生根效果最佳

此外,溪畔杜鹃生根率的大小,并不随着
naa

iba
浓度的高低而发生改变,说明
naa

iba
对其生根效果影响较小

因此适合溪畔杜鹃生根培养的培养基配方为
wpm 20g
·
l-1
蔗糖
naa1.0mg
·
l-1
iba1.5mg
·
l-1
ac1.0g
·
l-1

[0153]
从上述实施例可得出,本发明的专用培养基及其组织培养快繁方法,对溪畔杜鹃品种的组培快繁具有成套性

专用性

特效性和综合效果,该发明使萌发率到达
50
%以上,生根率可达到
80
%以上,还提高了丛生苗的增殖率及壮苗率,为溪畔杜鹃大规模产业化发展提供理论依据和配套的技术手段,建立高效的栽培模式和管理技术,保留优良性状的同时,降低了育苗成本

[0154]
以上所述仅为本发明的较佳实施例,凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰,皆应属本发明的涵盖范围

当前第1页1  
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
网站地图