用于靶向的制作方法-尊龙凯时官方app下载

文档序号:36175601发布日期:2023-11-25 01:11阅读:96来源:国知局
用于靶向的制作方法
用于靶向cd28和pd-l1的多特异性抗体及其使用方法
1.交叉引用
2.本技术要求
2020

10

30
日提交的美国临时申请号
63/107,942、2021
年1月
25
日提交的美国临时申请号
63/141,268、2021
年5月
18
日提交的美国临时申请号
63/189,843、2020

12
月9日提交的美国临时申请号
63/123,327、2021
年5月
12
日提交的美国临时申请号
63/187,719、2020

12
月9日提交的美国临时申请号
63/123,329、2021
年5月
12
日提交的美国临时申请号
63/187,699、2021
年5月
12
日提交的美国临时申请号
63/187,690
的权益,所述申请中的每一个均通过引用整体并入本文

3.序列表
4.本技术含有按
ascii
格式以电子方式递交并特此通过引用整体并入的序列表

所述
ascii
副本创建于
2021

10

27
日,名称为
52426-726_601_sl.txt
并且大小为
483,304
字节



技术实现要素:

5.在某些实施方案中,本文公开了多特异性抗体,其包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域,其中当所述
cd28
结合结构域是单链可变片段
(scfv)
时,所述
pd-l1
结合结构域不是
scfv。
在一些情况下,所述多特异性抗体是根据下式:
6.a-l-b(

i)
7.其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
包含连接a与b的接头

在一些情况下,所述
cd28
结合结构域包含单链可变片段

单结构域抗体
、fab

fab'。
在一些情况下,所述
cd28
结合结构域包含所述单链可变片段

在一些情况下,所述
cd28
结合结构域包含所述单结构域抗体

在一些情况下,所述
cd28
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'。
在一些情况下,所述
pd-l1
结合结构域包含单结构域抗体
、fab

fab'。
在一些情况下,所述
pd-l1
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'。
在一些情况下,所述
pd-l1
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'
,并且所述
cd28
结合结构域包含所述单链可变片段

在一些情况下,包含所述
fab
或所述
fab'
的所述
pd-l1
结合结构域包含
fab
重链多肽和
fab
轻链多肽,所述
fab
重链多肽包含
fab
重链可变结构域,所述
fab
轻链多肽包含
fab
轻链可变结构域

在一些情况下,包含所述单链可变片段的所述
cd28
结合结构域包含
scfv
重链可变结构域和
scfv
轻链可变结构域

在一些情况下,所述接头连接a的c末端与b的n末端

在一些情况下,所述接头连接a的n末端与b的c末端

在一些情况下,所述接头连接a的c末端与所述
fab
重链多肽的n末端

在一些情况下,所述接头连接a的n末端与所述
fab
重链多肽的c末端

在一些情况下,所述接头连接a的c末端与所述
fab
轻链多肽的n末端

在一些情况下,所述接头连接a的n末端与所述
fab
轻链多肽的c末端

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的n末端

在一些情况下,所述
接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的n末端

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的c末端

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的n末端

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的n末端

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的c末端

在一些情况下,所述接头的长度是至少5个氨基酸

在一些情况下,所述接头的长度不超过
30
个氨基酸

在一些情况下,所述接头的长度是至少5个氨基酸且不超过
30
个氨基酸

在一些情况下,所述接头的长度是5个氨基酸

在一些情况下,所述接头的长度是
15
个氨基酸

在一些情况下,所述接头选自
(g2s)n、(gs)n、(gsggs)n(seq id no:58)、(gggs)n(seq id no:59)、(ggggs)n(seq id no:60)

(gssggs)n(seq id no:61)
,其中n是至少1的整数

在一些情况下,
l
具有包含
(g2s)n(seq id no:233)
的式,其中n是1至3的整数

在一些情况下,所述接头包含
seq id no:18(ggggsggggsggggs)

seq id no:19(ggggs)
的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
重链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
scfv
重链可变结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:1

hc-cdr2

seq id no:2

hc-cdr3

seq id no:3
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些情况下,所述
scfv
轻链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
scfv
轻链可变结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:4

lc-cdr2

seq id no:5
;和
lc-cdr3

seq id no:6
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些情况下,所述
fab
重链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
fab
重链可变结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:10

hc-cdr2

seq id no:11

hc-cdr3

seq id no:12

hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26

hc-cdr1

seq id no:27

hc-cdr2

seq id no:28

hc-cdr3

seq id no:29
;或
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些情况下,所述
fab
轻链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
fab
轻链可变结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15

lc-cdr1

seq id no:33

lc-cdr2

seq id no:34
;和
lc-cdr3

seq id no:35

lc-cdr1

seq id no:36

lc-cdr2

seq id no:37
;和
lc-cdr3

seq id no:38
;或
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些情况下,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些情况下,所述
scfv
重链可
变结构域包含根据
seq id no:7
的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些情况下,所述
scfv
轻链可变结构域包含根据
seq id no:8
的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些情况下,所述
scfv
包含根据
seq id no:9
的氨基酸序列

在一些情况下,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17、43、45

47
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些情况下,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17、43、45

47
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17、43、45

47
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17、43、45

47
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些情况下,所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:17、43、45

47
的氨基酸序列

在一些情况下,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16、42、44

46
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些情况下,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16、42、44

46
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16、42、44

46
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16、42、44

46
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些情况下,所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:16、42、44

46
的氨基酸序列

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同
一性

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:20
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的氨基酸序列

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些情况下,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:23
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的氨基酸序列

8.在某些实施方案中,本文公开了药物组合物,其包含:本文所述的多特异性抗体;和药学上可接受的赋形剂

9.在某些实施方案中,本文公开了分离的重组核酸分子,其编码本文所述的多特异性抗体的多肽

10.在某些实施方案中,本文公开了治疗有需要的对象的癌症的方法,所述方法包括向所述对象施用本文所述的多特异性抗体或本文所述的药物组合物

在一些情况下,所述多特异性抗体作为单一药剂疗法施用于所述对象

在一些情况下,所述多特异性抗体不作为与第二治疗剂的治疗方案的一部分施用

在一些情况下,所述多特异性抗体不作为与包含肿瘤结合结构域的第二治疗剂的治疗方案的一部分施用

在一些情况下,所述多特异性抗体不作为与包含抗
cd19
抗体的第二治疗剂的治疗方案的一部分施用

在一些情况下,所述多特异性抗体不作为与包含抗体的第二治疗剂的治疗方案的一部分施用,所述抗体具有抗
cd19
结合结构域和抗
cd3
结合结构域

在一些情况下,所述多特异性抗体诱导
t
细胞介导的对肿瘤细胞的细胞毒性

在一些情况下,与施用所述多特异性抗体之前从所述对象获取的癌症的基线测量相比,向所述对象施用所述多特异性抗体足以减少或消除癌症

在一些情况下,所述减少是至少约1倍
、5

、10

、20

、40

、60

、80
倍或高达约
100


在一些情况下,所述癌症是恶性血液病

在一些情况下,所述癌症是白血病或淋巴瘤

在一些情况下,所述癌症是淋巴瘤,并且其中所述淋巴瘤是b细胞淋巴瘤

在一些情况下,所述癌症是实体瘤

在一些情况下,所述实体瘤表达
pd-l1。
在一些情况下,所述实体瘤是肉瘤

乳腺癌

肺癌或癌

在一些情况下,所述实体瘤是肺癌,并且其中所述肺癌是非小细胞肺癌

本文公开了治疗有需要的对象的癌症的方法,所述方法包括向所述对象施用包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体,其中包含所述
cd28
结合结构域和所述
pd-l1
结合结构域的所述多特异性抗体不作为与另一种多特异性抗体的治疗方案的一部分施用,所述另一种多特异性抗体靶向不同于
pd-l1

cd28
的癌症抗原

在一些实施方案中,包含所述
cd28
结合结构域和所述
pd-l1
结合结构域的所述多特异性抗体作为单一药剂疗法施用于所述对象

在一些实施方案中,包含所述
cd28
结合结构域和所述
pd-l1
结合结构域的所述多特异性抗体包含
igg
框架
、iga
框架
、ige
框架或
igm
框架

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含单链可变片段

单结构域抗体
、fab

fab'。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含单链可变片段

单结构域抗体
、fab

fab'。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含单链可变片段,并且所述
cd28
结合结构域包含单链可变片段

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含抗
cd28
轻链多肽

在一些实施方案中,所述抗
cd28
轻链多肽包含
igg1、igg2、igg3

igg4
轻链的可变结构域

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含抗
cd28
重链多肽

在一些实施方案中,所述抗
cd28
重链多肽包含
igg1、igg2、igg3

igg4
重链的可变结构域

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含抗
pd-l1
轻链多肽

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包含
igg1、igg2、igg3

igg4
轻链的可变结构域

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含抗
pd-l1
重链多肽

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含
igg1、igg2、igg3

igg4
重链的可变结构域

在一些实施方案中,所述多特异性抗体还包含可结晶片段
(fc)


在一些实施方案中,所述
fc
区包含
igg ch2
结构域和
igg ch3
结构域

在一些实施方案中,所述
fc
区包括异二聚体
fc


在一些实施方案中,所述
fc
区包含至少一个增加所述多特异性抗体的半衰期的氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
fc
区包含至少一个调控其与
fc
受体的相互作用的氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
fc
区包含至少一个增加所述
fc
区与
fc
受体的结合的氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
fc
区包含至少一个降低所述
fc
区的糖基化的氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述修饰是氨基酸取代

缺失或添加

在一些实施方案中,所述修饰是氨基酸取代

在一些实施方案中,所述至少一个降低所述
fc
区的糖基化的氨基酸修饰包括在对应于人
igg1
的位置
n297
的位置处的氨基酸取代,其中所述编号是根据
kabat

eu
索引

在一些实施方案中,所述
fc
区是非岩藻糖基化的
(afucosylated)。
在一些实施方案中,所述抗
cd28
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
cd28
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:4

lc-cdr2

seq id no:5
;和
lc-cdr3

seq id no:6
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述抗
cd28
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
cd28
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:1

hc-cdr2

seq id no:2

hc-cdr3

seq id no:3
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15

lc-cdr1

seq id no:33

lc-cdr2

seq id no:34
;和
lc-cdr3

seq id no:35

lc-cdr1

seq id no:36

lc-cdr2

seq id no:37
;和
lc-cdr3

seq id no:38
;或
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41
;并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方
案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:10

hc-cdr2

seq id no:11

hc-cdr3

seq id no:12

hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26

hc-cdr1

seq id no:27

hc-cdr2

seq id no:28

hc-cdr3

seq id no:29
;或
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述多特异性抗体诱导
t
细胞介导的对肿瘤细胞的细胞毒性

在一些实施方案中,与施用所述多特异性抗体之前从所述对象获取的癌症的基线测量相比,向所述对象施用所述多特异性抗体足以减少或消除癌症

在一些实施方案中,所述减少是至少约1倍
、5

、10

、20

、40

、60

、80
倍或高达约
100


在一些实施方案中,所述癌症是恶性血液病

在一些实施方案中,所述癌症是白血病或淋巴瘤

在一些实施方案中,所述癌症是淋巴瘤,并且其中所述淋巴瘤是b细胞淋巴瘤

在一些实施方案中,所述癌症是实体瘤

在一些实施方案中,所述实体瘤表达
pd-l1。
在一些实施方案中,所述实体瘤是肉瘤

乳腺癌

肺癌或癌

在一些实施方案中,所述实体瘤是肺癌,并且其中所述肺癌是非小细胞肺癌

附图说明
11.本公开的新颖特征在所附权利要求书中特别地阐述

通过参考阐述了利用本公开的原理的说明性实施方案的以下详细描述和附图将获得对本公开的特征和优点的更好的理解,在附图中:
12.图
1a-1b
示出了
pdl1 x cd28
多特异性抗体的示例性方案

13.图2示出了使用靶标包被珠进行的体外免疫细胞激活测定的示例性方案

14.图
3a
示出了来自与单一药剂
pdl1 x cd28
多特异性
ab-1
一起培养的
pbmc

ifny
细胞因子释放的图

15.图
3b
示出了来自与单一药剂
pdl1 x cd28
多特异性
ab-1
一起培养的
pbmc

tnf
α
细胞因子释放的图

16.图
3c
示出了来自与单一药剂
pdl1 x cd28
多特异性
ab-1
一起培养的
pbmc

il-2
细胞因子释放的图

17.图
4a
示出了一段时间内响应于与
pdl1
靶标包被珠和
ab-1
共培养的
pbmc
的活免疫细胞数量的图

18.图
4b
示出了一段时间内响应于与
pdl1
靶标包被珠和
ab-1
共培养的
pbmc
的活
cd3
细胞数量的图

19.图
4c
示出了一段时间内响应于与
pdl1
靶标包被珠和
ab-1
共培养的
pbmc
的活
cd4
细胞数量的图

20.图
4d
示出了一段时间内响应于与
pdl1
靶标包被珠和
ab-1
共培养的
pbmc
的活
cd8
细胞数量的图

21.图
5a
示出了
ab-1
与生物素化的人
pd-l1
的结合动力学

22.图
5b
示出了抗
pd-l1 fab 1
与生物素化的人
pd-l1
的结合动力学

23.图
6a
示出了
ab-1
与生物素化的人
cd28
的结合动力学

24.图
6b
示出了
ab-2
与生物素化的人
cd28
的结合动力学

25.图
7a
示出了
ab-1
与人
pd-l1 fc
的结合动力学

26.图
7b
示出了
ab-1
与食蟹猴
pd-l1 fc
的结合动力学

27.图
8a
示出了
ab-1

ab-6

pd-l1
的结合,如通过
elisa
测量

28.图
8b
示出了
ab-1

ab-6

cd28
的结合,如通过
elisa
测量

29.图
9a
示出了靶向
cd28

pd-l1
的多特异性抗体的卡通配置,所述多特异性抗体与靶向肿瘤相关抗原
(
诸如
t
细胞的
trop2

cd3)

t
细胞接合器组合施用

30.图
9b-9d
示出了在靶标包被珠和
pbmc
共培养并且施用
ab-1
以及
ab-1

tce-1(

trop2 x cd3 t
细胞接合器
)
的组合之后如通过细胞因子释放测量的免疫细胞激活

31.图
9e-9h
示出了在靶标包被珠和
pbmc
共培养并且施用
ab-1
以及
ab-1

tce-1(

trop2 x cd3 t
细胞接合器
)
的组合之后的免疫细胞增殖

32.图
9i-9k
示出了携带不同的
pd-l1
结合结构域的不同取向的多肽复合物
(ab-1

ab-8)
与针对用肿瘤相关抗原和
pd-l1
包被的非免疫原性珠的
t
细胞接合器
(tce-3)
组合激活
pbmc
,如通过细胞因子释放测量

33.图
9l
示出了多肽复合物与
t
细胞接合器组合介导的
pbmc
的激活

34.图
9m-9s
示出了多肽复合物与
t
细胞接合器组合介导的
pbmc
的激活是
pdl1
密度依赖性的

35.图
10a-10c
示出了使用
lncap pdl1
阳性肿瘤细胞系进行的体外肿瘤细胞杀伤测定的结果,其中
ab-1

tce-2
在人
pbmc
的存在下共施用


ab-1
与抗
psma x cd3 t
细胞接合器
tce-2
组合时,通过细胞因子释放测量的体外肿瘤细胞杀伤和
pbmc
激活受到协同作用

36.图
10d
示出了
pbmc
使用
ab-1

tce-4
介导的
h292
肿瘤细胞体外杀伤的图

37.图
10e
示出了
pbmc
使用
ab-1

tractr-1
介导的
h292
肿瘤细胞体外杀伤的图

38.图
10f
示出了
pbmc
使用
ab-1
和用
mtsp1
预处理的
tractr
介导的
h292
肿瘤细胞体外杀伤的图

39.图
10g
示出了来自与
h292
细胞
、ab-1

tce-4
共培养的
pbmc

il-2
细胞因子释放的图

40.图
10h
示出了来自与
h292
细胞
、ab-1

tractr-1
共培养的
pbmc

il-2
细胞因子释放的图

41.图
10i
示出了来自与
h292
细胞
、ab-1
和用
mtsp1
预处理的
tractr-1
共培养的
pbmc

il-2
细胞因子释放的图

42.图
11
示出了单次
iv
大剂量注射之后
ab-1
在食蟹猴中的药代动力学

43.图
12a-12f
示出了
ab-1
的单次
iv
大剂量注射之后食蟹猴中的细胞因子释放

44.图
13a-13b
示出了
ab-1
的单次
iv
大剂量注射之后食蟹猴中的血清肝酶

45.图
14
示出了用于鉴定
p1

p2
肽的示意图,所述肽可以附接至
pd-l1

cd28
多特异性抗体,以用于在肿瘤微环境中进行选择性激活

所述示意图示出了一种定向进化和噬菌体展示技术,用于鉴定通过抗原结合结构域阻断抗原识别的肽

46.图
15a-15c
例示了包含本文所述的
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体可以作为单一疗法增加激活的示意图


15a
示出了
t
细胞攻击肿瘤细胞,并且潜在的二级信号是
pd-1(
停止
)

cd28(
前进
)。

15b
示出了肿瘤如何通过
pd-l1
使
t
细胞失活
。pd-l1/pd-1
触发停止信号,而
cd28(
前进
)
信号未被激活


15c
示出了重新激活的
t
细胞,其
中具有
pd-l1
结合结构域和
cd28
结合结构域的多特异性抗体通过将
pd-l1/pd-1
停止信号转换为
cd28
前进信号来重新激活
t
细胞

47.图
16
例示了包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体与
t
细胞接合器组合的示意图

具体实施方式
48.用于重新定向
t
细胞以介导癌细胞杀伤的双特异性抗体在临床前和临床研究中都显示出前景

已经用单链可变片段
(scfv)
,特别是双特异性
t
细胞接合器
(bite)
形式获得了有效的
t
细胞激活,其中一种
scfv
靶向肿瘤细胞抗原,并且另一种
scfv
靶向参与
t
细胞激活的表位,诸如
cd3。bite
的一个这种实例是靶向
cd19

cd3
的博纳吐单抗
(blinatumomab)
,它已在欧洲和美国被批准用于治疗化疗耐药性
cd19 b
细胞急性淋巴细胞白血病

尽管用
t
细胞接合器
(
诸如博纳吐单抗
)
取得了进展,但即使患者出于尚不完全了解的原因表达肿瘤抗原,患者对于治疗的应答也较差

49.通过与靶向共抑制免疫检查点程序性死亡配体
1(pd-l1)

/

cd28
的第二种抗体共施用,已经探索了增加
t
细胞接合器的
t
细胞细胞毒性的策略
。cd28
是一种在
t
细胞上表达的蛋白质,其提供
t
细胞激活和存活所需的共刺激信号

已知通过
cd28

bite
组合的刺激性信号传导会增加
t
细胞诱导的肿瘤细胞细胞毒性

然而,在先前的研究中,获得
t
细胞介导的对肿瘤细胞的细胞毒性的核心需要存在具有肿瘤结合结构域
(
诸如抗
cd19
抗体
)

cd3
结合结构域的
bite
,但是发现呈
scfv-scfv
形式的抗
cd28
和抗
pd-l1
的单一药剂施用不会诱导
t
细胞介导的针对肿瘤细胞的细胞毒性

50.t
细胞的激活是一个高度调控的过程,其通常需要两个信号传导事件才能完全发挥作用:第一信号在
mhc-抗原复合物结合时启动,这帮助
t
细胞受体
(tcr)
区分“自身”和“非自身”,并且第二信号通过共刺激受体的激活来启动

虽然第一识别信号激活
t
细胞并触发
t
细胞介导的对识别细胞的毒性,但是如果
t
细胞没有接收到第二共刺激信号,则这可能导致
t
细胞耐受性,由此
t
细胞继续识别肿瘤抗原,但不产生针对肿瘤细胞的免疫应答

第二共刺激信号阻止
t
细胞耐受性,并且进一步激活
t
细胞以增强对于靶向细胞的
t
细胞细胞毒性

51.包含如本文所述的
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体被设计来充当
pd-l1
的拮抗剂和
c28
的条件激动剂两者

虽然
cd28
激动作用已显示出一些临床前景,但是由于
cd28
全身激活引起的剂量限制性毒性,这种方法的功效受到限制

包含本文所述的
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体被设计来仅在
pd-l1
的存在下有条件地激动
cd28

pd-l1
经常被肿瘤过表达以避免
t
细胞介导的杀伤

另外,
pd-l1
的接合被设计来阻断
pd-1
结合并提供检查点抑制

这种组合提供了一种作用机制,其增强抗肿瘤应答并限制
cd28
激动作用的全身毒性

如图
11
所示,对本文所述的多特异性抗体的研究表明缺乏全身免疫系统激活,如通过缺乏细胞因子释放所证明的那样

尽管临床反应率前所未有,但大多数患者对于靶向
pd-1

pd-l1
的疗法没有产生应答,这部分是因为
t
细胞需要共刺激才能完全发挥作用

因此,单独的检查点抑制可能不足以完全使免疫系统攻击肿瘤

通过添加如本文所述的多特异性抗体可以获得另外的益处

52.本文公开了与
pd-l1

cd28
特异性结合的抗体,其能够作为单一药剂
(

15c)
或与
t
细胞接合器
(

16)
组合来诱导
t
细胞介导的对肿瘤细胞的细胞毒性

重要的是,靶向
pd-l1

cd28
的此类抗体能够作为单一药剂诱导
t
细胞介导的对肿瘤细胞的细胞毒性,即使不与特异性靶向肿瘤细胞抗原的第二药剂一起施用时也是如此,如图
15a-15c
的示意图所例示


pd-l1

cd28
特异性结合的此类抗体不呈
scfv-scfv
形式

53.本文公开了多特异性抗体,其包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域,其中当所述
cd28
结合结构域是单链可变片段
(scfv)
时,所述
pd-l1
结合结构域不是
scfv。
在一些实施方案中,所述多特异性抗体是根据下式:
54.a-l-b(

i)
55.其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
包含连接a与b的接头

在一些实施方案中,所述多特异性抗体具有下式:
56.a-l-b(

i)
57.其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
包含连接a与b的接头

在一些实施方案中,所述多特异性抗体具有下式:
58.a-l-b(

i)
59.其中a是所述
cd28
结合结构域;b是所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
是连接a与b的接头

在一些实施方案中,所述多特异性抗体是根据下式:
60.a-l-b(

i)
61.其中a是所述
cd28
结合结构域;b是所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
是连接a与b的接头

62.虽然本文已经示出并描述了本公开的优选实施方案,但对于本领域技术人员显而易见的是,此类实施方案仅以示例的方式提供

在不脱离本公开内容的情况下,本领域技术人员将会想到许多变化

改变和替换

应理解,在实施本公开时可以采用本文所述的本公开的实施方案的各种替代方案

旨在以所附权利要求书限定本公开的范围,并且由此涵盖这些权利要求范围内的方法和结构及其等同方案

63.定义
64.本文使用的术语仅用于描述特定情况的目的,而不旨在是限制性的

除非上下文另有明确说明,否则如本文所用的单数形式“一种
/
一个
(a)”、“一种
/
一个
(an)”和“所述
(the)”也旨在包括复数形式

此外,在术语“包括
(including)”、“包括
(includes)”、“具有
(having)”、“具有
(has)”、“具有
(with)”或其变体在具体实施方式和
/
或权利要求书中使用的程度上,此类术语旨在以与术语“包含
(comprising)”相似的方式是包含性的

65.术语“抗体”在最广泛的意义上使用,并且涵盖完全组装的抗体

可以结合抗原的抗体片段,例如
fab、f(ab')2、fv、
单链抗体
(scfv)、
双抗体

抗体嵌合体

杂交抗体

双特异性抗体等

66.术语“互补决定区”或“cdr”是抗体可变区的区段,其在结构上与抗体结合的表位互补,并且比可变区域的其余部分更具可变性

因此,
cdr
有时被称为高变区

可变区包含三个
cdr。cdr
肽可以通过构建编码感兴趣的抗体的
cdr
的基因来获得

例如,通过使用聚合酶链反应从产生抗体的细胞的
rna
合成可变区域来制备此类基因

参见例如
larrick
等人
,methods:a companion to methods in enzymology 2:106(1991)

courtenay-luck,“genetic manipulation of monoclonal antibodies,”monoclonal antibodies:production,engineering and clinical application,ritter
等人
(

),

166-179

(cambridge university press 1995)
;以及
ward
等人
,“genetic manipulation and expression of antibodies,”monoclonal antibodies:principles and applications,birch
等人
(

),

137-185

(wiley-liss,inc.1995)。
67.在一些情况下,抗体的
cdr
根据以下确定:
(i)kabat
编号系统
(kabat
等人
(197)ann.ny acad.sci.190:382-391

kabat
等人
(1991)sequences of proteins of immunological interest,
第5版
,u.s.department of health and human services,nih
公开号
.91-3242)
;或
(ii)chothia
编号方案,其在本文中被称为“chothia cdr”(
参见例如
chothia

lesk,1987,j.mol.biol.,196:901-917

al-lazikani
等人
,1997,j.mol.biol.,273:927-948

chothia
等人
,1992,j.mol.biol.,227:799-817

tramontano a
等人
,1990,j.mol.biol.215(1):175-82
;以及美国专利号
7,709,226)
;或
(iii)immunogenetics(imgt)
编号系统,例如在
lefranc,m.-p.,1999,the immunologist,7:132-136

lefranc,m.-p.
等人
,1999,nucleic acids res.,27:209-212(“imgt cdrs”)
中所述;或
(iv)maccallum
等人
,1996,j.mol.biol.,262:732-745。
还参见例如
martin,a.,"protein sequence and structure analysis of antibody variable domains,"antibody engineering,kontermann

diibel

,

31

,

422-439

,springer-verlag,berlin(2001)。
68.关于
kabat
编号系统,抗体重链分子内的
cdr
通常存在于氨基酸位置
31

35(
其在
35
后任选地可以包含一个或两个额外的氨基酸
(

kabat
编号方案中被称为
35a

35b))(cdrl)、
氨基酸位置
50

65(cdr2)
和氨基酸位置
95

102(cdr3)


使用
kabat
编号系统,抗体轻链分子内的
cdr
通常存在于氨基酸位置
24

34(cdrl)、
氨基酸位置
50

56(cdr2)
和氨基酸位置
89

97(cdr3)


如本领域技术人员熟知的,使用
kabat
编号系统,由于
fr

/

cdr
的缩短或延长,抗体可变结构域的实际线性氨基酸序列可以包含更少或额外的氨基酸,并且因此,氨基酸的
kabat
数不一定与其线性氨基酸数相同

69.术语“fab”是指含有轻链的恒定结构域和重链的第一恒定结构域
(ch1)
的蛋白质
。fab
片段与
fab'
片段的不同之处在于在重链
ch1
结构域的羧基末端处添加了一些残基,包括来自抗体铰链区的一个或多个半胱氨酸
。fab'-sh
是本文中
fab'
的名称,其中恒定结构域的一个或多个半胱氨酸残基带有游离巯基
。fab'
片段通过还原
f(ab')2
片段的重链二硫键来产生

抗体片段的其他化学偶联也是已知的

[0070]“单链可变片段
(scfv)”是抗体重链
(vh)
和轻链
(vl)
可变区的融合蛋白,通过
10
至约
25
个氨基酸的短接头肽连接

接头通常富含甘氨酸以提高柔性,以及丝氨酸或苏氨酸以提高溶解性,并且可以将
vh
的n末端与
vl
的c末端连接,或者反之亦然

所述蛋白质保留了原始抗体的特异性,尽管去除了恒定区域并引入了接头
。scfv
抗体例如在
houston,j.s.,methods in enzymol.203(1991)46-96)
中进行描述

另外,抗体片段包含具有以下
vh
结构域的特征,即能够与
vl
结构域一起,或
vl
结构域的特征,即能够与
vh
结构域一起组装到功能性抗原结合位点,并且从而提供全长抗体的抗原结合特性的单链多肽

[0071]
术语“多特异性”意指抗体能够与两个或更多个不同的抗原决定簇,例如两个或更多个结合位点特异性结合,每个位点由一对抗体重链可变结构域
(vh)
和抗体轻链可变结构域
(vl)
形成,或者在单结构域抗体的情况下,单可变结构域与不同的抗原结合

[0072]
如本文所用,关于序列的“氨基酸序列同一性百分比
(

)”被定义为:在比对序列并引入空位
(
如果需要以实现最大序列同一性百分比
)
之后,并且不将任何保守取代视为序
cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
cd28
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:1

hc-cdr2

seq id no:2

hc-cdr3

seq id no:3
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述抗
cd28
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
cd28
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:1

hc-cdr2

seq id no:2

hc-cdr3

seq id no:3。
[0080]
在一些实施方案中,所述抗
cd28
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
cd28
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:4

lc-cdr2

seq id no:5
;和
lc-cdr3

seq id no:6
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述抗
cd28
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
cd28
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:4

lc-cdr2

seq id no:5
;和
lc-cdr3

seq id no:6。
[0081]
在一些实施方案中,抗
cd28
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
cd28
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:1

hc-cdr2

seq id no:2

hc-cdr3

seq id no:3
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰;并且所述抗
cd28
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
cd28
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:4

lc-cdr2

seq id no:5
;和
lc-cdr3

seq id no:6
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0082]
在一些实施方案中,所述抗
cd28
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
cd28
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:1

hc-cdr2

seq id no:2

hc-cdr3

seq id no:3
;并且所述抗
cd28
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
cd28
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:4

lc-cdr2

seq id no:5
;和
lc-cdr3

seq id no:6。
[0083]

1.
如通过
imgt
定义确定的抗
cd28
重链多肽互补决定区
(cdr)。
[0084][0085]

2.
如通过
imgt
定义确定的抗
cd28
轻链多肽互补决定区
(cdr)。
[0086][0087]
在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含根据
seq id no:7
的氨基酸序列

[0088]
在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0089]
在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0090]
在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0091]
在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0092]
在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0093]
在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所

scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含根据
seq id no:8
的氨基酸序列

[0094]
在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0095]
在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0096]
在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基
具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0097]
在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0098]
在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0099]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
91
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
92
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
93
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
94
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实
施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含根据
seq id no:9
的氨基酸序列

[0100]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0101]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0102]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0103]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨
基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0104]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0105]

3.

cd28
轻链可变结构域

重链可变结构域序列和全长序列
。cdr
序列加下划线并使用
imgt
定义确定

[0106]
cdr2

hc-cdr3
,其中所述
cd28
结合结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:1

hc-cdr2

seq id no:2

hc-cdr3

seq id no:3
;并且所述
cd28
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
cd28
结合结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:4

lc-cdr2

seq id no:5
;和
lc-cdr3

seq id no:6。
[0112]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含根据
seq id no:7
的氨基酸序列

[0113]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0114]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0115]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基
酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0116]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0117]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
115
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0118]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:8
的氨
基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含根据
seq id no:8
的氨基酸序列

[0119]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0120]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0121]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0122]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸
残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0123]
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
80
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
90
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
95
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
105
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0124]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
91
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
92
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
93
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
94
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含根据
seq id no:9
的氨基酸序列

[0125]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨
基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0126]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0127]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0128]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210

连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0129]
在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0130]
pd-l1
结合结构域
[0131]
在此公开了包含
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含抗体或抗原结合片段

在一些实施方案中,所述抗体或抗原结合片段是单克隆抗体

在一些实施方案中,所述抗体或抗原结合片段是人抗体

鼠抗体

人源化抗体或嵌合抗体

在一些实施方案中,与
pd-l1
特异性结合的抗体或抗原结合片段包含抗
pd-l1
重链多肽和抗
pd-l1
轻链多肽

[0132]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域衍生自
bms-936559。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域衍生自阿替利珠单抗
(atezolizumab)、
德瓦鲁单抗
(durvalumab)
和阿维单抗
(avelumab)、ck-301、cs-1001、shr-1316、cbt-502、
恩沃利单抗
(envafolimab)

bgb-a333。
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含抗
pd-l1
重链可变结构域

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链可变结构域包含
igg
框架
、iga
框架
、ige
框架或
igm
框架

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链可变结构域包含
igg1、igg2、igg3

igg4
重链的可变结构域

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包含抗
pd-l1
轻链可变结构域

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链可变结构域包含
igg
框架
、iga
框架
、ige
框架或
igm
框架

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链可变结构域包含
igg1、igg2、igg3

igg4
轻链的可变结构域

[0133]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含单结构域抗体
、fab

fab'。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'。
在一些实施方案中,包含所述
fab
或所述
fab'
的所述
pd-l1
结合结构域包含
fab
重链多肽和
fab
轻链多肽,所述
fab
重链多肽包含
fab
重链可变结构域,所述
fab
轻链多肽包含
fab
轻链可变结构域

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包括包含所述
fab
重链可变结构域的所述
fab
重链多肽

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包括包含所述
fab
轻链可变结构域的所述
fab
轻链多肽

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含所述单链可变片段

在一些实施方案中,包含所述单链可变片段的所述
pd-l1
结合结构域包含
scfv
重链可变结构域和
scfv
轻链可变结构域

在一些实施方案
中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含所述
scfv
重链可变结构域

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包含所述
scfv
轻链可变结构域

[0134]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:10

hc-cdr2

seq id no:11

hc-cdr3

seq id no:12
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:10

hc-cdr2

seq id no:11

hc-cdr3

seq id no:12。
[0135]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15。
[0136]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:10

hc-cdr2

seq id no:11

hc-cdr3

seq id no:12
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰;并且所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0137]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:10

hc-cdr2

seq id no:11

hc-cdr3

seq id no:12
;并且所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15。
[0138]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26。
[0139]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

cdr3

seq id no:38
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0145]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:27

hc-cdr2

seq id no:28

hc-cdr3

seq id no:29
;并且所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:36

lc-cdr2

seq id no:37
;和
lc-cdr3

seq id no:38。
[0146]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32。
[0147]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41。
[0148]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰;并且所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0149]
在一些实施方案中,所述抗
pd-l1
重链多肽包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32
;并且所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41。
[0150]

4.
如通过
imgt
定义确定的抗
pd-l1
重链多肽互补决定区
(cdr)。
[0151][0152][0153]

5.
如通过
imgt
定义确定的抗
pd-l1
轻链多肽互补决定区
(cdr)。
[0154][0155][0156]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具
有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq idno:17
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:17
的氨基酸序列

[0157]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0158]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0159]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸
残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0160]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0161]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0162]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:16
的氨基酸序列

[0163]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0164]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0165]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0166]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸
残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0167]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0168]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

[0169]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:43
的氨基酸序列

[0170]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:43
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:43
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:43
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:43
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:43
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:43
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0171]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:42
的氨基酸序列

[0172]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:42
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:42
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:42
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:42
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:42
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0173]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

[0174]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基
酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:45
的氨基酸序列

[0175]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:45
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:45
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:45
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:45
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:45
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:45
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0176]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:44
的氨基酸序列

[0177]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:44
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:44
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列
同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:44
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:44
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:44
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0178]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

[0179]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:47
的氨基酸序列

[0180]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:47
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:47
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:47
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:47
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:47
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:47
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0181]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:46
的氨基酸序列

[0182]
在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:46
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:46
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:46
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:46
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:46
的至少
210
个连续氨基酸
残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0183]
在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

[0184]

6.

pd-l1 fab
轻链多肽和
fab
重链多肽序列
。cdr
序列加下划线并使用
imgt

义确定
[0185]
[0186]
[0187]
cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15。
[0193]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26。
[0194]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:33

lc-cdr2

seq id no:34
;和
lc-cdr3

seq id no:35
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:33

lc-cdr2

seq id no:34
;和
lc-cdr3

seq id no:35。
[0195]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰;并且所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:33

lc-cdr2

seq id no:34
;和
lc-cdr3

seq id no:35
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0196]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26
;并且所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:33

lc-cdr2

seq id no:34
;和
lc-cdr3

seq id no:35。
[0197]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:27

hc-cdr2

seq id no:28

hc-cdr3

seq id no:29
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:27

hc-cdr2

seq id no:28

hc-cdr3

seq id no:29。
[0198]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

cdr3

seq id no:41
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0204]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32
;并且所述
pd-l1
结合结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
pd-l1
结合结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41。
[0205]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含根据
seq id no:17
的氨基酸序列

[0206]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0207]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至

215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0208]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0209]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0210]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至

215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0211]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含根据
seq id no:16
的氨基酸序列

[0212]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0213]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0214]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0215]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0216]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0217]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具
有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

[0218]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含根据
seq id no:43
的氨基酸序列

[0219]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:43
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:43
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:43
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:43
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:43
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:43

至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0220]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含根据
seq id no:42
的氨基酸序列

[0221]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:42
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:42
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:42
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:42
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:42
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0222]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1

合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

[0223]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含根据
seq id no:45
的氨基酸序列

[0224]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:45
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:45
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:45
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:45
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:45
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:45
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0225]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含根据
seq id no:44
的氨基酸序列

[0226]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:44
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:44
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:44
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:44
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:44
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0227]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至

96
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

[0228]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含根据
seq id no:47
的氨基酸序列

[0229]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:47
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:47
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:47
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:47
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:47
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:47
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
220
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0230]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含根据
seq id no:46
的氨基酸序列

[0231]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:46
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
175
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:46
的至少
190
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
190
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:46
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:46
的至少
205
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
205
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含
seq id no:46
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0232]
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
70
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列;并且所述
pd-l1
结合结构域包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结
no:247)

(gssggs)n(seq id no:248)
,其中n是1至
10
的整数

[0236]
在一些实施方案中,所述接头具有式
(g2s)n,其中n是至少1的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gs)n,其中n是至少1的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gsggs)n(seq id no:58)
,其中n是至少1的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gggs)n(seq id no:59)
,其中n是至少1的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(ggggs)n(seq id no:60)
,其中n是至少1的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gssggs)n(seq id no:61)
,其中n是至少1的整数

[0237]
在一些实施方案中,所述接头具有式
(g2s)n,其中n是整数
1。
在一些实施方案中,
l1具有式
(gs)n,其中n是整数
1。
在一些实施方案中,所述接头具有式
(gsggs)n(seq id no:234)
,其中n是整数
1。
在一些实施方案中,所述接头具有式
(gggs)n(seq id no:235)
,其中n是整数
1。
在一些实施方案中,所述接头具有式
(ggggs)n(seq id no:236)
,其中n是整数
1。
在一些实施方案中,所述接头具有式
(gssggs)n(seq id no:237)
,其中n是整数
1。
[0238]
在一些实施方案中,所述接头具有式
(g2s)n(seq id no:233)
,其中n是1至3的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gs)n(seq id no:238)
,其中n是1至3的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gsggs)n(seq id no:239)
,其中n是1至3的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gggs)n(seq id no:240)
,其中n是1至3的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(ggggs)n(seq id no:241)
,其中n是1至3的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gssggs)n(seq id no:242)
,其中n是1至3的整数

[0239]
在一些实施方案中,所述接头具有式
(g2s)n(seq id no:243)
,其中n是1至
10
的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gs)n(seq id no:244)
,其中n是1至
10
的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gsggs)n(seq id no:245)
,其中n是1至
10
的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gggs)n(seq id no:246)
,其中n是1至
10
的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(ggggs)n(seq id no:247)
,其中n是1至
10
的整数

在一些实施方案中,所述接头具有式
(gssggs)n(seq id no:248)
,其中n是1至
10
的整数

[0240]

7.
接头序列
[0241][0242]
在一些实施方案中,所述接头连接a的c末端与b的n末端

在一些实施方案中,所述接头连接a的n末端与b的c末端

在一些实施方案中,所述接头连接a的c末端与所述
fab
重链多肽的n末端

在一些实施方案中,所述接头连接a的n末端与所述
fab
重链多肽的c末端

在一些实施方案中,所述接头连接a的c末端与所述
fab
轻链多肽的n末端

在一些实施方案中,所述接头连接a的n末端与所述
fab
轻链多肽的c末端

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的n末端

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的n末端

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的c末端

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的n末端

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的n末端

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的c末端

[0243]

cd28

pd-l1
结合的多特异性抗体
[0244]
在一些实施方案中,包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体具有各种多特异性抗体形式

在一些实施方案中,所述多特异性抗体包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域,其中当所述
cd28
结合结构域是单链可变片段
(scfv)
时,所述
pd-l1
结合结构域不是
scfv。
[0245]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体还包含可结晶片段
(fc)


在一些实施方案中,所述
fc
区包含
igg ch2
结构域和
igg ch3
结构域

在一些实施方案中,所述
fc
区包括异二聚体
fc


在一些实施方案中,所述
fc
区包含至少一个增加所述多特异性抗体的半衰期的氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
fc
区包含至少一个调控其与
fc
受体的相互作用的氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
fc
区包含至少一个增加所述
fc
区与
fc
受体的结合的氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
fc
区包含至少一个降低所述
fc
区的糖基化的氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述修饰是氨基酸取代

缺失或添加

在一些实施方案中,所述修饰是氨基酸取代

在一些实施方案中,所述至少一个降低所述
fc
区的糖基化的氨基酸修饰包括在对应于人
igg1
的位置
n297
的位置处的氨基酸取代,其中所述编号是根据
kabat

eu
索引

在一些实施方案中,所述
fc
区是非岩藻糖基化的

[0246]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体由在相同生产细胞中表达的至少两个不同的重链和轻链组装

在一些实施方案中,所述多特异性抗体使用杵臼
(knobs-into-holes)
技术产生,以强迫发生将突变引入两个
ch3
结构域中的重链异源二聚化

[0247]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体缺乏可结晶片段
(fc)


在一些实施方案中,两个或更多个不同的抗体连接在一起以形成所述多特异性抗体

在一些实施方案中,两个不同的抗体连接在一起以形成所述多特异性抗体

例如,所述
pd-l1
结合结构域是
fab

fab'
并且与
cd28
结合结构域连接,所述
cd28
结合结构域是
scfv、
另一种
fab

fab'
或单结构域抗体

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域是
scfv
并且与
pd-l1
结合结构域连接,所述
pd-l1
结合结构域是
fab

fab'
或单结构域抗体

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域是单结构域抗体并且与
cd28
结合结构域连接,所述
cd28
结合结构域是另一种单结构域抗体

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域是
fab

fab'
并且与
cd28
结合结构域连接,所述
cd28
结合结构域是另一种
fab

fab'。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域是
fab

fab'
并且与
cd28
结合结构域连接,所述
cd28
结合结构域是单结构域抗体

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域是
fab

fab'
并且与
cd28
结合结构域连接,所述
cd28
结合结构域是
scfv。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域是单结构域抗体并且与
cd28
结合结构域
连接,所述
cd28
结合结构域是
fab

fab'。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域是单结构域抗体并且与
cd28
结合结构域连接,所述
cd28
结合结构域是
scfv。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域是
scfv
并且与
cd28
结合结构域连接,所述
cd28
结合结构域是
fab

fab'。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域是
scfv
并且与
cd28
结合结构域连接,所述
cd28
结合结构域是单结构域抗体

在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域是
scfv
并且与
cd28
结合结构域连接,所述
cd28
结合结构域是
scfv。
[0248]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:20
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:20
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:20
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的氨基酸
序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:20
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的氨基酸序列

[0249]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0250]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
470
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0251]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0252]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq idno:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0253]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0254]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:21
的至少
450
个连续
氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0255]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:23
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的氨基酸序列

[0256]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
220
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变
结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
460
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0257]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0258]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
90
%序列同一性

[0259]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0260]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
96
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
96
%序列同一性

[0261]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
97
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
97
%序列同一性

[0262]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq idno:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
98
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
98
%序列同一性

[0263]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域
的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0264]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:48
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:48
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:48
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:48
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:42
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:48
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:48
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:42
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:48
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:48
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:42
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:48
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:42
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:48
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:42
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:48
的氨基酸序列

[0265]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:42
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:48
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:48
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0266]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:42
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:42
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:48
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:48
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0267]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:49
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:49
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:49
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:49
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:49
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸
序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:49
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:43
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:49
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:43
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:49
的氨基酸序列

[0268]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:43
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:49
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:49
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0269]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:43
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:43
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:49
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:49
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0270]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:50
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:50
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:50
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽
的氨基酸序列包含与根据
seq id no:50
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:44
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:50
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:50
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:44
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:50
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:50
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:44
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:50
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:44
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:50
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:44
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:50
的氨基酸序列

[0271]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:44
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:50
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:50
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0272]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:44
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:44
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:50
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:50
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0273]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域
的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:51
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:51
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:51
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:51
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:51
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:51
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:45
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:51
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:45
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:51
的氨基酸序列

[0274]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:45
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:51
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:51
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0275]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:45
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨
基酸序列,并且与
seq id no:45
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:51
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:51
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0276]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:52
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:52
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:52
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:52
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:46
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:52
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:52
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:46
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:52
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:52
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:46
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:52
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:46
的氨基酸序列具有至少
99
%序
列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:52
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:46
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:52
的氨基酸序列

[0277]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:46
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:52
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:52
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0278]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:46
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:46
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:52
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:52
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0279]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:53
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:53
的氨基酸序列具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:53
的氨基酸序列具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:53
的氨基酸序列具有至少
96
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:53
的氨基酸序列具有至少
97
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:53
的氨基酸序列具有至少
98
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:47
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:53
的氨基酸序列具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:47
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:53
的氨基酸序列

[0280]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:47
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:53
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:53
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
95
%序列同一性

[0281]
在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:47
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:47
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:53
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:53
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
99
%序列同一性

[0282]

8.

cd28

pd-l1
结合的抗体序列
。cdr
序列加下划线并使用
imgt
定义确定
[0283]
[0284]
[0285]
[0286]
[0287]
[0288]
[0289]
[0290]
[0291]
[0292]
[0293]
[0294]
[0295]
[0296][0297]
[0298]
在一些实施方案中,本文所述的多特异性抗体具有改善的肿瘤细胞杀伤活性

在一些实施方案中,所述多特异性抗体在细胞杀伤测定中具有小于约
300
皮摩尔
(pm)

ic50。
在一些实施方案中,所述多特异性抗体在细胞杀伤测定中具有小于约
200
皮摩尔
(pm)

ic50。
在一些实施方案中,所述多特异性抗体在细胞杀伤测定中具有小于约
100
皮摩尔
(pm)

ic50。
在一些实施方案中,所述多特异性抗体在细胞杀伤测定中具有小于约
75
皮摩尔
(pm)

ic50。
在一些实施方案中,所述多特异性抗体在细胞杀伤测定中具有小于约
50
皮摩尔
(pm)

ic50。
在一些实施方案中,所述多特异性抗体在细胞杀伤测定中具有小于约
25
皮摩尔
(pm)

ic50。
在一些实施方案中,所述多特异性抗体在细胞杀伤测定中具有小于约
10
皮摩尔
(pm)

ic50。
[0299]
在一些实施方案中,本文所述的多特异性抗体很少或不触发免疫细胞的非特异性激活

在一些实施方案中,本文所述的多特异性抗体很少或不触发细胞因子释放

在一些实施方案中,本文所述的多特异性抗体很少或不触发从免疫细胞释放
ifny、tnf-α

il-2。
在一些实施方案中,本文所述的多特异性抗体很少或不触发免疫细胞的增殖

[0300]

cd28

pd-l1
结合的多特异性抗体:用于肿瘤微环境中的选择性激活的形式
[0301]
在一些实施方案中,本文所述的多特异性抗体在肿瘤微环境中被选择性激活

[0302]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体是根据以下子式:
p
1-l
1-a-l-b(

ia)
,其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;
l
包含连接a与b的接头;
p1包含与a结合的肽,并且
l1包含连接a与
p1的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0303]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体是根据以下子式:
a-l-b-l
2-p2(

ib)
,其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;
l
包含连接a与b的接头;
p2包含与b结合的肽,并且
l2包含连接b与
p2的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0304]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体是根据以下子式:
p
1-l
1-a-l-b-l
2-p2(

ic)
,其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;
l
包含连接a与b的接头;
p1包含与a结合的肽,并且
l1包含连接a与
p1的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物;
p2包含与b结合的肽,并且
l2包含连接b与
p2的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0305]
半衰期延长分子
(h1)
[0306]
在一些实施方案中,式
ia、

ib、

ic
的多特异性抗体还包含半衰期延长分子
(h1)。
在一些实施方案中,
h1与
p1连接

在一些实施方案中,
h1与
p2连接

在一些实施方案中,
h1不阻断a与
cd28
结合

在一些实施方案中,
h1包含连接
h1与
p1或
h1与
p2的连接部分
(l5)。
在一些实施方案中,半衰期延长分子
(h1)
不具有与
pd-l1
的结合亲和力

在一些实施方案中,所述半衰期延长分子
(h1)
不具有与
cd28
的结合亲和力

在一些实施方案中,所述半衰期延长分子
(h1)
不使所述多特异性抗体免受
cd28
的作用

[0307]
在一些实施方案中,
h1包含如表9中公开的序列或与其基本上相同的序列
(
例如,具有至少
90

、95

、96

、97

、98
%或
99
%序列同一性的序列
)。
[0308]

9.h1序列
[0320]
[0321][0322]
在一些实施方案中,
l1与a的n末端结合

在一些实施方案中,
l1与a的c末端结合

在一些实施方案中,
l2与b的n末端结合

在一些实施方案中,
l2与b的c末端结合

在一些实施方案中,当
l1通过肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p1不再与a结合,从而将a暴露于
cd28。
在一些实施方案中,当
l2通过肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p2不再与b结合,从而将b暴露于
pd-l1。
[0323]
在一些实施方案中,
l1或
l2包含经修饰的氨基酸或非天然氨基酸

或经修饰的非天然氨基酸或其组合

在一些实施方案中,所述经修饰的氨基酸或经修饰的非天然氨基酸包含翻译后修饰

在一些实施方案中,
l1或
l2包含修饰,所述修饰包括但不限于乙酰化

酰化
、adp-核糖基化

酰胺化

黄素的共价附接

血红素部分的共价附接

核苷酸或核苷酸衍生物的共价附接

脂质或脂质衍生物的共价附接

磷脂酰肌醇的共价附接

交联

环化

二硫键形成

去甲基化

共价交联的形成

胱氨酸的形成

焦谷氨酸的形成

甲酰化

γ
羧化

糖基化
、gpi
锚形成

羟基化

碘化

甲基化

肉豆蔻酰化

氧化

蛋白水解加工

磷酸化

异戊烯化

外消旋化

硒酰化

硫酸化

转移-rna
介导的向蛋白质中添加氨基酸,诸如精氨酸化和泛素化


l1或
l2的任何地方进行修饰,包括肽骨架或氨基酸侧链

[0324]

(p1和
p2)
[0325]
p1或
p2被设计成通过噬菌体展示和定量结合测定的迭代过程针对特异性抗原结合结构域进行优化,所述迭代过程被设计来选择能够阻止与
cd28

pd-l1
结合的那些肽

包括噬菌体文库的基于定向进化的过程用于鉴定
p1或
p2。
对能够阻断抗原结合结构域与其靶标
cd28

pd-l1
结合的潜在抑制性肽进行多个选择和扩增循环,目的是优化血清中被掩蔽的
pd-l1 x cd28
抗体并限制切割,从而降低毒性


18
中描绘了
p1或
p2的发现

[0326]
在一些实施方案中,
p1削弱a与
cd28
的结合

在一些实施方案中,
p1通过离子相互作用

静电相互作用

疏水相互作用

π
堆积相互作用和h键相互作用或其组合与a结合

在一些实施方案中,
p1在抗原结合位点处或附近与a结合

在一些实施方案中,当
l1通过肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p1不再与a结合,从而将a暴露于
cd28。
在一些实施方案中,
p1与
cd28
具有小于
70
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p1与
cd28
具有小于
75
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p1与
cd28
具有小于
80
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p1与
cd28
具有小于
85
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p1与
cd28
具有小于
90
%的序列同一性

在一些实施
方案中,
p1与
cd28
具有小于
95
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p1与
cd28
具有小于
98
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p1与
cd28
具有小于
99
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p1包含与
cd28
共享小于
10
%的序列同一性的全新
(de novo)
氨基酸序列

[0327]
在一些实施方案中,
p2削弱b与
pd-l1
的结合

在一些实施方案中,
p2通过离子相互作用

静电相互作用

疏水相互作用

π
堆积相互作用和h键相互作用或其组合与b结合

在一些实施方案中,
p2在抗原结合位点处或附近与b结合

在一些实施方案中,当
l2通过肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p2不再与b结合,从而将b暴露于
pd-l1。
在一些实施方案中,
p2与
pd-l1
具有小于
70
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p2与
pd-l1
具有小于
75
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p2与
pd-l1
具有小于
80
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p2与
pd-l1
具有小于
85
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p2与
pd-l1
具有小于
90
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p2与
pd-l1
具有小于
95
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p2与
pd-l1
具有小于
98
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p2与
pd-l1
具有小于
99
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p2包含与
pd-l1
共享小于
10
%的序列同一性的全新氨基酸序列

[0328]
在一些实施方案中,
p1或
p2包含长度为至少5个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p1或
p2包含长度为至少6个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p1或
p2包含长度为至少
10
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p1或
p2包含长度为至少
10
个氨基酸且长度不超过
20
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p1或
p2包含长度为至少
16
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p1或
p2包含长度不超过
40
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p1或
p2包含至少两个半胱氨酸氨基酸残基

在一些实施方案中,
p1或
p2包含环状肽或线性肽

在一些实施方案中,
p1或
p2包含环状肽

在一些实施方案中,
p1或
p2包含线性肽

[0329]
在一些实施方案中,
p1或
p2包含经修饰的氨基酸或非天然氨基酸

或经修饰的非天然氨基酸或其组合

在一些实施方案中,所述经修饰的氨基酸或经修饰的非天然氨基酸包含翻译后修饰

在一些实施方案中,
p1或
p2包含修饰,所述修饰包括但不限于乙酰化

酰化
、adp-核糖基化

酰胺化

黄素的共价附接

血红素部分的共价附接

核苷酸或核苷酸衍生物的共价附接

脂质或脂质衍生物的共价附接

磷脂酰肌醇的共价附接

交联

环化

二硫键形成

去甲基化

共价交联的形成

胱氨酸的形成

焦谷氨酸的形成

甲酰化

γ
羧化

糖基化
、gpi
锚形成

羟基化

碘化

甲基化

肉豆蔻酰化

氧化

蛋白水解加工

磷酸化

异戊烯化

外消旋化

硒酰化

硫酸化

转移-rna
介导的向蛋白质中添加氨基酸,诸如精氨酸化和泛素化


p1或
p2的任何地方进行修饰,包括肽骨架

氨基酸侧链和末端

[0330]
在一些实施方案中,
p1或
p2不包含白蛋白或白蛋白片段

在一些实施方案中,
p1或
p2不包含白蛋白结合结构域

[0331]
编码与
cd28

pd-l1
结合的多特异性抗体的多核苷酸
[0332]
在一些实施方案中,本文公开了分离的重组核酸分子,其编码本文公开的多特异性抗体

在一些实施方案中,本文公开了分离的重组核酸分子,其编码包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体,其中当所述
cd28
结合结构域是单链可变片段
(scfv)
时,所述
pd-l1
结合结构域不是
scfv。
[0333]
在一些实施方案中,所述分离的重组核酸分子编码根据下式的多特异性抗体:
[0334]
a-l-b(

i)
[0335]
其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
包含连接a与
no:53
的氨基酸的分离多肽

[0357]
在一些实施方案中,本文公开了分离的重组核酸分子,其编码包含根据
seq id no:47
的氨基酸的分离多肽

[0358]
药物组合物
[0359]
在一些实施方案中,本文公开了药物组合物,其包含:
(a)
如本文公开的多特异性抗体;和
(b)
药学上可接受的赋形剂

[0360]
在一些实施方案中,所述药物组合物包含
(a)
包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体,其中当所述
cd28
结合结构域是单链可变片段
(scfv)
时,所述
pd-l1
结合结构域不是
scfv
;和
(b)
药学上可接受的赋形剂

在一些实施方案中,所述药物组合物包含
(a)
根据下式的多特异性抗体:
[0361]
a-l-b(

i)
[0362]
其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
包含连接a与b的接头;和
(b)
药学上可接受的赋形剂

在一些实施方案中,所述药物组合物包含
(a)
根据下式的多特异性抗体:
[0363]
a-l-b(

i)
[0364]
其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
包含连接a与b的接头;和
(b)
药学上可接受的赋形剂

在一些实施方案中,所述药物组合物包含
(a)
根据下式的多特异性抗体:
[0365]
a-l-b(

i)
[0366]
其中a是所述
cd28
结合结构域;b是所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
是连接a与b的接头;和
(b)
药学上可接受的赋形剂

在一些实施方案中,所述药物组合物包含
(a)
根据下式的多特异性抗体:
[0367]
a-l-b(

i)
[0368]
其中a是所述
cd28
结合结构域;b是所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
是连接a与b的接头;和
(b)
药学上可接受的赋形剂

[0369]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体还包含可检测标记

治疗剂或药代动力学改变部分

在一些实施方案中,所述可检测标记包括荧光标记

放射性标记



核酸探针或造影剂

[0370]
为了向对象施用,如本文公开的多特异性抗体可以与一种或多种药学上可接受的载剂或赋形剂一起提供在药物组合物中

术语“药学上可接受的载剂”包括但不限于任何不干扰成分的生物活性的有效性并且对所施用的患者无毒的载剂

合适的药用载剂的实例是本领域熟知的,并且包括磷酸盐缓冲盐水溶液



乳液诸如油
/
水乳液

各种类型的润湿剂

无菌溶液等

此类载剂可以通过常规方法配制并且可以合适的剂量施用于对象

优选地,组合物是无菌的

这些组合物还可以包含佐剂,诸如防腐剂

乳化剂和分散剂

可以通过纳入各种抗细菌剂和抗真菌剂来确保微生物作用的预防

[0371]
所述药物组合物可以呈任何合适的形式
(
取决于所需的施用方法
)。
它可以呈单位剂型提供,可以在密封容器中提供,并且可以作为试剂盒的一部分提供

这种试剂盒可以包括使用说明书

它可以包括多个所述单位剂型

[0372]
所述药物组合物可以适于通过任何适当的途径施用,包括肠胃外
(
例如,皮下


肉内或静脉内
)
途径

此类组合物可以通过药学领域已知的任何方法制备,例如通过在无菌条件下将活性成分与一种或多种载剂或一种或多种赋形剂混合

[0373]
本公开的物质的剂量可以在广泛的限度之间变化,这取决于所治疗的疾病或病症

所治疗的个体的年龄和状况等,并且医生将最终确定所使用的适当剂量

[0374]
使用方法
[0375]
在一些实施方案中,是治疗有需要的对象的癌症的方法,所述方法包括向所述对象施用如本文公开的与
cd28

pd-l1
结合的多特异性抗体

[0376]
在一些实施方案中,所述癌症包括表达
pd-l1
的癌细胞

[0377]
在一些实施方案中,所述癌症是恶性血液病

在一些实施方案中,其中所述癌症是白血病或淋巴瘤

在一些实施方案中,所述癌症是淋巴瘤,并且其中所述淋巴瘤是b细胞淋巴瘤

在一些实施方案中,所述癌症是实体瘤

在一些实施方案中,所述实体瘤是肉瘤

乳腺癌

肺癌或癌

在一些实施方案中,所述实体瘤是肺癌,并且其中所述肺癌是非小细胞肺癌

[0378]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体诱导
t
细胞介导的对肿瘤细胞的细胞毒性

在一些实施方案中,与施用所述多特异性抗体之前从所述对象获取的癌症的基线测量相比,向所述对象施用所述多特异性抗体足以减少或消除癌症

在一些实施方案中,所述减少是至少约1倍
、5

、10

、20

、40

、60

、80
倍或高达约
100


[0379]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体作为单一药剂疗法施用于所述对象

[0380]
在一些实施方案中,所述对象是检查点抑制剂疗法难治的

[0381]
在一些实施方案中,所述对象在检查点抑制剂疗法后复发

[0382]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体不作为与第二治疗剂的治疗方案的一部分施用

在一些实施方案中,所述多特异性抗体不作为与包含肿瘤结合结构域的第二治疗剂的治疗方案的一部分施用

在一些实施方案中,所述多特异性抗体不作为与包含抗
cd19
抗体的第二治疗剂的治疗方案的一部分施用

在一些实施方案中,所述多特异性抗体不作为与包含抗体的第二治疗剂的治疗方案的一部分施用,所述抗体具有抗
cd19
结合结构域和抗
cd3
结合结构域

[0383]
在一些实施方案中,所述多特异性抗体是如本文公开的与
cd28

pd-l1
结合的任何多特异性抗体

[0384]
本文公开了治疗有需要的对象的癌症的方法,所述方法包括向所述对象施用包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体,其中包含所述
cd28
结合结构域和所述
pd-l1
结合结构域的所述多特异性抗体不作为与另一种多特异性抗体的治疗方案的一部分施用,所述另一种多特异性抗体靶向不同于
pd-l1

cd28
的癌症抗原

在一些实施方案中,所述多特异性抗体包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域,其中当所述
cd28
结合结构域是单链可变片段
(scfv)
时,所述
pd-l1
结合结构域不是
scfv。
在一些实施方案中,所述多特异性抗体是根据下式:
a-l-b(

i)
,其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
包含连接a与b的接头

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含单链可变片段

单结构域抗体
、fab

fab'。
在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含所述单链可变片段

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含所述单结构域抗体

在一些实施方案中,所述
cd28
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含单结构域抗体
、fab

fab'。
在一些实施方案中,所述
pd-l1
结合结构域包含所述
cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
fab
重链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
fab
重链可变结构域的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:10

hc-cdr2

seq id no:11

hc-cdr3

seq id no:12
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

在一些实施方案中,所述
fab
轻链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
fab
轻链可变结构域的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0390]
在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
重链可变结构域包含根据
seq id no:7
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
轻链可变结构域包含根据
seq id no:8
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
scfv
包含根据
seq id no:9
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:17
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16

至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:16
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:20
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

在一些实施方案中,所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:23
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的氨基酸序列

[0391]
本文公开了治疗有需要的对象的癌症的方法,所述方法包括向所述对象施用包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体,其中包含所述
cd28
结合结构域和所述
pd-l1
结合结构域的所述多特异性抗体不作为与另一种多特异性抗体的治疗方案的一部分施用,所述另一种多特异性抗体靶向不同于
pd-l1

cd28
的癌症抗原

在一些实施方案中,包含所述
cd28
结合结构域和所述
pd-l1
结合结构域的所述多特异性抗体作为单一药剂
cdr2

hc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
重链多肽的
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32
;并且所述抗
pd-l1
轻链多肽包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述抗
pd-l1
轻链多肽的
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41。
[0406]
组合疗法
[0407]
在一些实施方案中,是治疗有需要的对象的癌症的方法,所述方法包括向所述对象施用包含如本文所述的
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域的多特异性抗体与抗癌疗法的组合

[0408]
在一些实施方案中,所述对象是检查点抑制剂疗法难治的

[0409]
在一些实施方案中,所述对象在检查点抑制剂疗法后复发

[0410]
在一些实施方案中,所述抗癌疗法包括小分子疗法

基于细胞的疗法或基于抗体的疗法

[0411]
在一些实施方案中,所述基于抗体的疗法是
t
细胞接合器

[0412]
在一些实施方案中,所述
t
细胞接合器具有根据以下的式:
d-l
0-e(

ii)
,其中d包含与效应细胞抗原结合的效应细胞结合结构域,e包含与肿瘤抗原结合的肿瘤抗原结合结构域,并且
l0包含连接d与e的接头

在一些实施方案中,d包含单链可变片段

单结构域抗体或
fab
片段

在一些实施方案中,d包含所述单链可变片段

在一些实施方案中,e包含单链可变片段

单结构域抗体或
fab
片段

在一些实施方案中,e包含所述
fab
片段

在一些实施方案中,所述效应细胞抗原包含
cd3。
在一些实施方案中,所述效应细胞结合结构域包含选自以下的互补决定区
(cdr)
:莫罗单抗-cd3(okt3)、
奥昔组单抗
(otelixizumab

trx4)、
替利组单抗
(teplizumab

mga031)、
维西珠单抗
(visilizumab

nuvion)、sp34、x35、vit3、bma030(bw264/56)、clb-t3/3、cris7、yth12.5、f111-409、clb-t3.4.2、tr-66、wt32、spv-t3b、11d8、xiii-141、xiii-46、xiii-87、12f6、t3/rw2-8c8、t3/rw2-4b6、okt3d、m-t301、smc2、f101.01、ucht-1、wt-31、15865、15865v12、15865v16

15865v19。
在一些实施方案中,所述效应细胞结合结构域包含如表
11
中公开的氨基酸序列

[0413]

11.
效应细胞结合结构域包含氨基酸序列
(
如通过
imgt
编号系统确定的
cdr)。
[0414]
[0415]
[0416][0417]
在一些实施方案中,所述肿瘤抗原包括表皮生长因子受体
(egfr)、
前列腺特异性膜抗原
(psma)
或肿瘤相关钙信号转导蛋白
2(
在本文中被称为
trop2)。
[0418]
在一些实施方案中,所述肿瘤抗原包括
egfr。
在一些实施方案中,所述癌症具有表达
egfr
的细胞

在一些实施方案中,所述癌症包括结直肠癌
(crc)、
头颈鳞状细胞癌
(scchn)、
非小细胞肺癌
(nsclc)、
前列腺癌

乳腺癌

结肠
/
直肠癌

头颈癌

胃食管癌

肝癌

胶质母细胞瘤

宫颈癌

卵巢癌

膀胱癌

肾癌或胰腺癌

在一些实施方案中,所述肿瘤抗原结合结构域包含如表
12
中公开的氨基酸序列

[0419]

12.
肿瘤抗原结合结构域氨基酸序列


egfr(
通过
imgt
定义的
cdr)
[0420]
[0421]
[0422][0423]
[0424]
在一些实施方案中,所述肿瘤抗原包括
trop2。
在一些实施方案中,所述癌症具有表达
trop2
的细胞

在一些情况下,所述癌症是实体瘤癌症

在一些实施方案中,所述癌症是肺癌

乳腺癌
(
例如,
her2

er/pr

tnbc)、
宫颈癌

卵巢癌

结直肠癌

胰腺癌

胃癌

尿路上皮癌

子宫内膜癌

头颈癌或神经胶质瘤

在一些实施方案中,所述肿瘤抗原结合结构域包含如表
13
中公开的氨基酸序列


13.
肿瘤抗原结合结构域氨基酸序列


trop2(
通过
imgt
定义的
cdr)
[0425]
[0426][0427]
在一些实施方案中,所述肿瘤抗原包括
psma。
在一些实施方案中,所述癌症包括前列腺癌

在一些实施方案中,所述癌症包括转移性去势抵抗性前列腺癌
(mcrpc)。
在一些实施方案中,所述肿瘤抗原结合结构域包含如表
14
中公开的氨基酸序列

[0428]

14.
肿瘤抗原结合结构域氨基酸序列


psma(
通过
imgt
定义的
cdr)
[0429]
[0430]
[0431][0432]
在一些实施方案中,所述
t
细胞接合器分子在肿瘤微环境中被选择性激活

[0433]
在一些实施方案中,本文所述的多特异性抗体在肿瘤微环境中被选择性激活

[0434]
在一些实施方案中,所述
t
细胞接合器是根据以下子式:
p
3-l
3-d-l
0-e(

iia)
,其中d包含所述
cd3
结合结构域;e包含所述肿瘤抗原结合结构域;
l0包含连接d与e的接头;
p3包含与d结合的肽,并且
l3包含连接d与
p3的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0435]
在一些实施方案中,所述
t
细胞接合器是根据以下子式:
d-l
0-e-l
4-p4(

iib)
,其中d包含所述
cd3
结合结构域;e包含所述肿瘤抗原结合结构域;
l0包含连接d与e的接头;
p4包含与e结合的肽,并且
l4包含连接e与
p4的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0436]
在一些实施方案中,所述
t
细胞接合器是根据以下子式:
p
3-l
3-d-l
0-e-l
4-p4(

iic)
,其中d包含所述
cd3
结合结构域;e包含所述肿瘤抗原结合结构域;
l0包含连接d与e的接头;
p3包含与d结合的肽,并且
l3包含连接d与
p3的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物;
p4包含与e结合的肽,并且
l4包含连接e与
p4的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0437]
在一些实施方案中,所述
t
细胞接合器包含半衰期延长分子
(h1)。
连接部分
(l3或
l4)
[0438]
在一些实施方案中,
l3或
l4是具有至少5个至不超过
50
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
l3或
l4是具有至少
10
个至不超过
30
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
l3或
l4是具有至少
10
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
l3或
l4是具有至少
18
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
l3或
l4是具有至少
26
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
l3或
l4具有包括
(g2s)n(seq id no:233)
的式,其中n是1至3的整数

在一些实施方案中,
l3或
l4具有包括
(g2s)n的式,其中n是至少1的整数

在一些实施方案中,
l3或
l4具有选自以下的式:
(g2s)n、(gs)n、(gsggs)n(seq id no:58)、(gggs)n(seq id no:59)、(ggggs)n(seq id no:60)

(gssggs)n(seq id no:61)
,其中n是至少1的整数

在一些实施方案中,所述肿瘤特异性蛋白酶选自金属蛋白酶

丝氨酸蛋白酶

半胱氨酸蛋白酶

苏氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶

在一些实施方案中,
l3或
l4包含尿激酶可切割氨基酸序列

蛋白裂解酶可切割氨基酸序列

豆荚蛋白可切割氨基酸序列或基质金属蛋白酶可切割氨基酸序列

在一些实施方案中,
l3或
l4包含如表
10
中公开的序列或与其基本上相同的序列
(
例如,具有
0、1
或2个氨基酸修饰的序列
)。
[0439]
在一些实施方案中,
l3与d的n末端结合

在一些实施方案中,
l3与d的c末端结合

在一些实施方案中,
l4与e的n末端结合

在一些实施方案中,
l4与e的c末端结合

在一些实施方
案中,当
l3通过肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p3不再与d结合,从而将d暴露于
cd3。
在一些实施方案中,当
l4通过肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p4不再与e结合,从而将e暴露于肿瘤抗原

[0440]
在一些实施方案中,
l3或
l4包含经修饰的氨基酸或非天然氨基酸

或经修饰的非天然氨基酸或其组合

在一些实施方案中,所述经修饰的氨基酸或经修饰的非天然氨基酸包含翻译后修饰

在一些实施方案中,
l3或
l4包含修饰,所述修饰包括但不限于乙酰化

酰化
、adp-核糖基化

酰胺化

黄素的共价附接

血红素部分的共价附接

核苷酸或核苷酸衍生物的共价附接

脂质或脂质衍生物的共价附接

磷脂酰肌醇的共价附接

交联

环化

二硫键形成

去甲基化

共价交联的形成

胱氨酸的形成

焦谷氨酸的形成

甲酰化

γ
羧化

糖基化
、gpi
锚形成

羟基化

碘化

甲基化

肉豆蔻酰化

氧化

蛋白水解加工

磷酸化

异戊烯化

外消旋化

硒酰化

硫酸化

转移-rna
介导的向蛋白质中添加氨基酸,诸如精氨酸化和泛素化


l3或
l4的任何地方进行修饰,包括肽骨架或氨基酸侧链

[0441]

(p3和
p4)
[0442]
p3或
p4被设计成通过噬菌体展示和定量结合测定的迭代过程针对特异性抗原结合结构域进行优化,所述迭代过程被设计来选择能够阻止与
cd3
或肿瘤抗原结合的那些肽

包括噬菌体文库的基于定向进化的过程用于鉴定
p3或
p4。
对能够阻断抗原结合结构域与其靶标
cd3
或肿瘤抗原结合的潜在抑制性肽进行多个选择和扩增循环,目的是优化血清中被掩蔽的
t
细胞接合器抗体并限制切割,从而降低毒性


18
中描绘了
p3或
p4的发现

[0443]
在一些实施方案中,
p3削弱d与
cd3
的结合

在一些实施方案中,
p3通过离子相互作用

静电相互作用

疏水相互作用

π
堆积相互作用和h键相互作用或其组合与d结合

在一些实施方案中,
p3在抗原结合位点处或附近与d结合

在一些实施方案中,当
l3通过肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p3不再与d结合,从而将d暴露于
cd3。
在一些实施方案中,
p3与
cd3
具有小于
70
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p3与
cd3
具有小于
75
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p3与
cd3
具有小于
80
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p3与
cd3
具有小于
85
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p3与
cd3
具有小于
90
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p3与
cd3
具有小于
95
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p3与
cd3
具有小于
98
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p3与
cd3
具有小于
99
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p3包含与
cd3
共享小于
10
%的序列同一性的全新氨基酸序列

[0444]
在一些实施方案中,
p4削弱e与肿瘤抗原的结合

在一些实施方案中,
p4通过离子相互作用

静电相互作用

疏水相互作用

π
堆积相互作用和h键相互作用或其组合与e结合

在一些实施方案中,
p4在抗原结合位点处或附近与e结合

在一些实施方案中,当
l4通过肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p4不再与e结合,从而将e暴露于肿瘤抗原

在一些实施方案中,
p4与肿瘤抗原具有小于
70
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p4与肿瘤抗原具有小于
75
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p4与肿瘤抗原具有小于
80
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p4与肿瘤抗原具有小于
85
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p4与肿瘤抗原具有小于
90
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p4与肿瘤抗原具有小于
95
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p4与肿瘤抗原具有小于
98
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p4与肿瘤抗原具有小于
99
%的序列同一性

在一些实施方案中,
p4包含与肿瘤抗原共享小于
10
%的序列同一性的全新氨基酸序列

[0445]
在一些实施方案中,
p3或
p4包含长度为至少5个氨基酸的肽序列

在一些实施方案
中,
p3或
p4包含长度为至少6个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p3或
p4包含长度为至少
10
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p3或
p4包含长度为至少
10
个氨基酸且长度不超过
20
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p3或
p4包含长度为至少
16
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p3或
p4包含长度不超过
40
个氨基酸的肽序列

在一些实施方案中,
p3或
p4包含至少两个半胱氨酸氨基酸残基

在一些实施方案中,
p3或
p4包含环状肽或线性肽

在一些实施方案中,
p3或
p4包含环状肽

在一些实施方案中,
p3或
p4包含线性肽

[0446]
在一些实施方案中,
p3或
p4包含经修饰的氨基酸或非天然氨基酸

或经修饰的非天然氨基酸或其组合

在一些实施方案中,所述经修饰的氨基酸或经修饰的非天然氨基酸包含翻译后修饰

在一些实施方案中,
p3或
p4包含修饰,所述修饰包括但不限于乙酰化

酰化
、adp-核糖基化

酰胺化

黄素的共价附接

血红素部分的共价附接

核苷酸或核苷酸衍生物的共价附接

脂质或脂质衍生物的共价附接

磷脂酰肌醇的共价附接

交联

环化

二硫键形成

去甲基化

共价交联的形成

胱氨酸的形成

焦谷氨酸的形成

甲酰化

γ
羧化

糖基化
、gpi
锚形成

羟基化

碘化

甲基化

肉豆蔻酰化

氧化

蛋白水解加工

磷酸化

异戊烯化

外消旋化

硒酰化

硫酸化

转移-rna
介导的向蛋白质中添加氨基酸,诸如精氨酸化和泛素化


p3或
p4的任何地方进行修饰,包括肽骨架

氨基酸侧链和末端

[0447]
在一些实施方案中,
p3或
p4不包含白蛋白或白蛋白片段

在一些实施方案中,
p3或
p4不包含白蛋白结合结构域

[0448]
抗体的产生
[0449]
在一些实施方案中,本文所述的多肽
(
例如,抗体及其结合片段
)
使用本领域已知的可用于合成多肽
(
例如,抗体
)
的任何方法,具体地通过化学合成或通过重组表达产生,并且优选通过重组表达技术产生

[0450]
在一些情况下,抗体或其结合片段重组表达,并且编码所述抗体或其结合片段的核酸由化学合成的寡核苷酸组装而成
(
例如,如
kutmeier
等人
,1994,biotechniques 17:242
中所述
)
,这涉及合成含有编码抗体的序列的一部分的重叠寡核苷酸,对这些寡核苷酸进行退火和连接,然后通过
pcr
扩增连接的寡核苷酸

[0451]
可替代地,编码抗体的核酸分子任选地通过使用与序列的
3'

5'
端可杂交的合成引物进行
pcr
扩增,或通过使用对特定基因序列具有特异性的寡核苷酸探针进行克隆从合适的来源
(
例如,抗体
cdna
文库,或从表达免疫球蛋白的任何组织或细胞生成的
cdna
文库
)
生成

[0452]
在一些情况下,抗体或其结合任选地通过对动物
(
诸如小鼠
)
进行免疫以生成多克隆抗体或更优选地通过生成单克隆抗体来生成,例如,如由
kohler

milstein(1975,nature 256:495-497)
或如由
kozbor
等人
(1983,immunology today 4:72)

cole
等人
(1985

monoclonal antibodies and cancer therapy,alan r.liss,inc.,

77-96

)
所述

可替代地,编码所述抗体的至少
fab
部分的克隆任选地通过筛选
fab
表达文库
(
例如,如在
huse
等人
,1989,science 246:1275-1281
中所述
)
以获得结合特定抗原的
fab
片段的克隆或通过筛选抗体文库
(
参见例如
clackson
等人
,1991,nature 352:624

hane
等人
,1997proc.natl.acad.sci.usa 94:4937)
来获得

[0453]
在一些实施方案中,使用通过剪接来自具有适当抗原特异性的小鼠抗体分子的基因以及来自具有适当生物活性的人抗体分子的基因来产生“嵌合抗体”而开发的技术
78:2072)

neo
,其赋予对于氨基糖苷
g-418
的抗性
(clinical pharmacy 12:488-505

wu

wu,1991,biotherapy 3:87-95

tolstoshev,1993,ann.rev.pharmacol.toxicol.32:573-596

mulligan,1993,science 260:926-932
;以及
morgan

anderson,1993,ann.rev.biochem.62:191-217

1993
年5月
,tib tech 11(5):155-215)
以及
hygro
,其赋予对于潮霉素的抗性
(santerre
等人
,1984,gene 30:147)。
可以使用的重组
dna
技术领域中通常已知的方法在以下中描述:
ausubel
等人
(

,1993,current protocols in molecular biology,john wiley&sons,ny

kriegler,1990,gene transfer and expression,a laboratory manual,stockton press,ny
;以及第
12

13

,dracopoli
等人
(

),1994,current protocols in human genetics,john wiley&sons,ny.

colberre-garapin
等人
,1981,j.mol.biol.150:1)。
[0459]
在一些情况下,抗体的表达水平通过载体扩增而增加
(
关于综述,参见
bebbington

hentschel,the use of vectors based on gene amplification for the expression of cloned genes in mammalian cells in dna cloning,
第3卷
.(academic press,new york,1987))。
当表达抗体的载体系统中的标志物是可扩增的时,宿主细胞的培养物中存在的抑制剂的水平增加将使标志物基因的拷贝数增加

因为扩增区与抗体的核苷酸序列相关联,所以所述抗体的产生也将增加
(crouse
等人
,1983,mol.cell biol.3:257)。
[0460]
在一些情况下,使用本领域中已知的用于抗体纯化的任何方法,例如,通过色谱法
(
例如,离子交换色谱法

亲和色谱法
(
特别是通过对于蛋白a之后特定抗原的亲和力
)
和定径柱色谱法
)、
离心

差别溶解度或者通过用于纯化蛋白质的任何其他标准技术

[0461]
表达载体
[0462]
在一些实施方案中,载体包括衍生自真核或原核来源的任何合适的载体

在一些情况下,载体是从细菌
(
例如,大肠杆菌
)、
昆虫

酵母
(
例如,毕赤酵母
)、
藻类或哺乳动物来源获得的

示例性细菌载体包括
pacyc177、pask75、pbad
载体系列
、pbadm
载体系列
、pet
载体系列
、petm
载体系列
、pgex
载体系列
、phat、phat2、pmal-c2、pmal-p2、pqe
载体系列
、prset a、prset b、prset c、ptrchis2
系列
、pza31-luc、pze21-mcs-1、pflag ats、pflag cts、pflag mac、pflag shift-12c、ptac-mat-1、pflag ctc

ptac-mat-2。
[0463]
示例性昆虫载体包括
pfastbac1、pfastbac dual、pfastbac et、pfastbac hta、pfastbac htb、pfastbac htc、pfastbac m30a、pfastbact m30b、pfastbac、m30c、pvl1392、pvl1393、pvl1393 m10、pvl1393m11、pvl1393 m12、flag
载体诸如
ppolh-flag1

ppolh-mat 2
或者
mat
载体诸如
ppolh-mat1

ppolh-mat2。
[0464]
在一些情况下,酵母载体包括
pdest
tm
14
载体
、pdest
tm
15
载体
、pdest
tm
17
载体
、pdest
tm
24
载体
、pyes-dest52
载体
、pbad-dest49
目的载体
、pao815
毕赤酵母属载体
、pfld1
巴斯德毕赤酵母载体
、pgapz a、b
和c巴斯德毕赤酵母载体
、ppic3.5k
毕赤酵母属载体
、ppic6 a、b
和c毕赤酵母属载体
、ppic9k
毕赤酵母属载体
、ptef1/zeo、pyes2
酵母载体
、pyes2/ct
酵母载体
、pyes2/nt a、b
和c酵母载体或
pyes3/ct
酵母载体

[0465]
示例性藻类载体包括
pchlamy-4
载体或
mcs
载体

[0466]
哺乳动物载体的实例包括瞬时表达载体或稳定表达载体

哺乳动物瞬时表达载体
可以包括
prk5、p3xflag-cmv 8、pflag-myc-cmv 19、pflag-myc-cmv 23、pflag-cmv 2、pflag-cmv 6a,b,c、pflag-cmv 5.1、pflag-cmv 5a,b,c、p3xflag-cmv 7.1、pflag-cmv 20、p3xflag-myc-cmv 24、pcmv-flag-mat1、pcmv-flag-mat2、pbicep-cmv 3

pbicep-cmv 4。
哺乳动物稳定表达载体可以包括
pflag-cmv 3、p3xflag-cmv 9、p3xflag-cmv 13、pflag-myc-cmv 21、p3xflag-myc-cmv 25、pflag-cmv 4、p3xflag-cmv 10、p3xflag-cmv 14、pflag-myc-cmv 22、p3xflag-myc-cmv 26、pbicep-cmv 1

pbicep-cmv 2。
[0467]
在一些情况下,无细胞系统是来自细胞的细胞质和
/
或细胞核组分的混合物,并且用于体外核酸合成

在一些情况下,无细胞系统利用原核细胞组分或真核细胞组分

有时,核酸合成是在基于例如果蝇细胞

非洲爪蟾卵或
hela
细胞的无细胞系统中获得的

示例性无细胞系统包括但不限于大肠杆菌
s30
提取系统

大肠杆菌
t7 s30
系统或
[0468]
宿主细胞
[0469]
在一些实施方案中,宿主细胞包括任何合适的细胞,诸如天然来源的细胞或遗传修饰的细胞

在一些情况下,宿主细胞是生产宿主细胞

在一些情况下,宿主细胞是真核细胞

在其他情况下,宿主细胞是原核细胞

在一些情况下,真核细胞包括真菌
(
例如,酵母细胞
)、
动物细胞或植物细胞

在一些情况下,原核细胞是细菌细胞

细菌细胞的实例包括革兰氏阳性细菌或革兰氏阴性细菌

有时,革兰氏阴性细菌是厌氧的

杆状的或两者兼有

[0470]
在一些情况下,革兰氏阳性细菌包括放线菌门

厚壁菌门或软壁菌门

在一些情况下,革兰氏阳性细菌包括产水菌门
(aquificae)、
异常球菌-栖热菌门
(deinococcus-thermus)、
纤维杆菌门

绿菌门
/
拟杆菌门
(fibrobacteres

chlorobi/bacteroidetes)(fcb group)、
梭杆菌门
(fusobacteria)、
芽单胞菌门
(gemmatimonadetes)、
硝化螺旋菌门
(nitrospirae)、
浮霉菌门

疣微菌门
/
衣原体门
(planctomycetes-verrucomicrobia/chlamydiae)(pvc group)、
变形菌门
(proteobacteria)、
螺旋体门
(spirochaetes)
或互养菌门
(synergistetes)。
其他细菌可以是酸杆菌门
(acidobacteria)、
绿弯菌门
(chloroflexi)、
产金菌门
(chrysiogenetes)、
蓝细菌
(cyanobacteria)、
脱铁杆菌门
(deferribacteres)、
网团菌门
(dictyoglomi)、
热脱硫杆菌门
(thermodesulfobacteria)
或热袍菌门
(thermotogae)。
细菌细胞可以是大肠杆菌
(
大肠埃希氏菌
)、
肉毒杆菌
(clostridium botulinum)
或大肠杆菌
(coli bacilli)。
[0471]
示例性原核宿主细胞包括但不限于
bl21、mach1
tm
、dh10b
tm
、top10、dh5
α
、dh10bac
tm
、omnimax
tm
、megax
tm
、dh12s
tm
、inv110、top10f’、inv
α
f、top10/p3、ccdb survival、pir1、pir2、stbl2
tm
、stbl3
tm

stbl4
tm

[0472]
在一些情况下,动物细胞包括来自脊椎动物或无脊椎动物的细胞

在一些情况下,动物细胞包括来自海洋无脊椎动物

鱼类

昆虫

两栖动物

爬行动物或哺乳动物的细胞

在一些情况下,真菌细胞包括酵母细胞,诸如啤酒酵母

面包酵母或葡萄酒酵母

[0473]
真菌包括子囊菌诸如酵母

霉菌

丝状真菌

担子菌或接合菌

在一些情况下,酵母包括子囊菌门或担子菌门

在一些情况下,子囊菌门包括酵母亚门
(saccharomycotina)(
真酵母,例如酿酒酵母
(
面包酵母
))
或外囊菌亚门
(taphrinomycotina)(
例如,裂殖酵母纲
(
裂殖酵母
))。
在一些情况下,担子菌门包括伞菌亚门
(agaricomycotina)(
例如,银耳纲
(tremellomycetes))
或柄锈菌亚门
(pucciniomycotina)(
例如,微球黑粉菌纲
(microbotryomycetes))。
[0474]
示例性酵母或丝状真菌包括例如以下属:酵母菌属
(saccharomyces)、
裂殖酵母属
(schizosaccharomyces)、
念珠菌属
(candida)、
毕赤酵母属
(pichia)、
汉逊酵母属
(hansenula)、
克鲁维酵母属
(kluyveromyces)、
接合酵母
(zygosaccharomyces)、
耶氏酵母属
(yarrowia)、
丝孢酵母属
(trichosporon)、
红冬孢酵母属
(rhodosporidi)、
曲霉属
(aspergillus)、
镰孢霉属
(fusarium)
或木霉属
(trichoderma)。
示例性酵母或丝状真菌包括例如以下物种:酿酒酵母
(saccharomyces cerevisiae)、
粟酒裂殖酵母
(schizosaccharomyces pombe)、
产朊假丝酵母
(candida utilis)、
博伊丁假丝酵母
(candida boidini)、
白假丝酵母
(candida albicans)、
热带假丝酵母
(candida tropicalis)、
星形念珠菌
(candida stellatoidea)、
光滑念珠菌
(candida glabrata)、
克柔念珠菌
(candida krusei)、
近平滑念珠菌
(candida parapsilosis)、
季蒙假丝酵母
(candida guilliermondii)、
维斯假丝酵母
(candida viswanathii)、
葡萄牙假丝酵母
(candida lusitaniae)、
胶红酵母
(rhodotorula mucilaginosa)、
甲醇毕赤酵母
(pichia metanolica)、
安格斯毕赤酵母
(pichia angusta)、
巴斯德毕赤酵母
(pichia pastoris)、
异常毕赤酵母
(pichia anomala)、
多形汉逊酵母
(hansenula polymorpha)、
乳酸克鲁维酵母
(kluyveromyces lactis)、
鲁氏接合酵母
(zygosaccharomyces rouxii)、
解脂耶氏酵母
(yarrowia lipolytica)、
茁芽丝孢酵母
(trichosporon pullulans)、
圆红冬孢酵母-黑曲霉
(rhodosporidium toru-aspergillus niger)、
构巢曲霉
(aspergillus nidulans)、
泡盛曲霉
(aspergillus awamori)、
米曲霉
(aspergillus oryzae)、
里氏木霉
(trichoderma reesei)、
解脂耶氏酵母
(yarrowia lipolytica)、
布鲁塞尔酒香酵母
(brettanomyces bruxellensis)、
星形假丝酵母
(candida stellata)、
粟酒裂殖酵母
(schizosaccharomyces pombe)、
孢圆酵母
(torulaspora delbrueckii)、
拜耳接合酵母
(zygosaccharomyces bailii)、
新型隐球菌
(cryptococcus neoformans)、
加特隐球酵母
(cryptococcus gattii)
或布拉氏酵母
(saccharomyces boulardii)。
[0475]
示例性酵母宿主细胞包括但不限于巴斯德毕赤酵母菌株,诸如
gs115、km71h、smd1168、smd1168h

x-33
;以及酿酒酵母菌株,诸如
invsc1。
[0476]
在一些情况下,额外的动物细胞包括从软体动物

节肢动物

蜥蜴或海绵动物中获得的细胞

在一些情况下,额外的动物细胞是哺乳动物细胞,例如,来自灵长类动物

猿类







犬科动物

猫科动物或啮齿动物

在一些情况下,啮齿动物包括小鼠

大鼠

仓鼠

沙鼠

仓鼠

栗鼠

花枝鼠或豚鼠

[0477]
示例性哺乳动物宿主细胞包括但不限于
293a
细胞系
、293ft
细胞系
、293f
细胞
、293h
细胞
、cho dg44
细胞
、cho-s
细胞
、cho-k1
细胞
、fut8 ko chok1、expi293f
tm
细胞
、flp-in
tm
t-rex
tm
293
细胞系
、flp-in
tm-293
细胞系
、flp-in
tm-3t3
细胞系
、flp-in
tm-bhk
细胞系
、flp-in
tm-cho
细胞系
、flp-in
tm-cv-1
细胞系
、flp-in
tm-jurkat
细胞系
、freestyle
tm
293-f
细胞
、freestyle
tm
cho-s
细胞
、griptite
tm
293msr
细胞系
、gs-cho
细胞系
、heparg
tm
细胞
、t-rex
tm
jurkat
细胞系
、per.c6
细胞
、t-rex
tm-293
细胞系
、t-rex
tm-cho
细胞系和
t-rex
tm-hela
细胞系

[0478]
在一些情况下,哺乳动物宿主细胞是稳定细胞系,或者是将感兴趣的遗传物质整合到其自身基因组中并且能够在多代细胞分裂之后表达遗传物质的产物的细胞系

在一些
情况下,哺乳动物宿主细胞是瞬时细胞系,或者是没有将感兴趣的遗传物质整合到其自身基因组中并且不能在多代细胞分裂之后表达遗传物质的产物的细胞系

[0479]
示例性昆虫宿主细胞包括但不限于果蝇
s2
细胞
、sf9
细胞
、sf21
细胞
、high five
tm
细胞和细胞

[0480]
在一些情况下,植物细胞包括来自藻类的细胞

示例性昆虫细胞系包括但不限于来自莱茵衣藻
137c(chlamydomonas reinhardtii 137c)
或细长聚球藻
ppc 7942(synechococcus elongatus ppc 7942)
的菌株

[0481]
制品
[0482]
在本公开的另一方面,提供了一种制品,其含有可用于治疗

预防和
/
或诊断以上所述的病症的材料

所述制品包含容器和在容器上或与容器相关的标签或包装插页

合适的容器包括例如瓶

小瓶

注射器
、iv
溶液袋等

容器可以由多种材料
(
诸如玻璃或塑料
)
形成

[0483]
标签或包装插页指示所述组合物用于治疗所选的病状

本公开的此实施方案中的制品还可以包含指示所述组合物可以用于治疗特定病状的包装插页

[0484]
可替代地或另外,所述制品还可以包含含有药学上可接受的缓冲液
(
诸如注射用抑菌水
(bwfi)、
磷酸盐缓冲盐水

林格氏溶液和右旋糖溶液
)
的第二
(
或第三
)
容器

它还可以包含从商业和使用者的角度来看所希望的其他材料,包括其他缓冲液

稀释剂

过滤器

针和注射器

[0485]
实施方案
[0486]
实施方案1包括一种多特异性抗体,其包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域

[0487]
实施方案2包括如实施方案1所述的多特异性抗体,其中当所述
cd28
结合结构域是单链可变片段
(scfv)
时,所述
pd-l1
结合结构域不是
scfv。
[0488]
实施方案3包括如实施方案
1-2
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述多特异性抗体是根据下式:
a-l-b(

i)
,其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;并且
l
包含连接a与b的接头

[0489]
实施方案4包括如实施方案
1-3
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
cd28
结合结构域包含单链可变片段

单结构域抗体
、fab

fab'。
[0490]
实施方案5包括如实施方案4所述的多特异性抗体,其中所述
cd28
结合结构域包含所述单链可变片段

[0491]
实施方案6包括如实施方案4所述的多特异性抗体,其中所述
cd28
结合结构域包含所述单结构域抗体

[0492]
实施方案7包括如实施方案4所述的多特异性抗体,其中所述
cd28
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'。
[0493]
实施方案8包括如实施方案
1-7
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
pd-l1
结合结构域包含单链可变片段

单结构域抗体
、fab

fab'。
[0494]
实施方案9包括如实施方案8所述的多特异性抗体,其中所述
pd-l1
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'。
[0495]
实施方案
10
包括如实施方案8所述的多特异性抗体,其中所述
pd-l1
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'
,并且所述
cd28
结合结构域包含所述单链可变片段

[0496]
实施方案
11
包括如实施方案9所述的多特异性抗体,其中包含所述
fab
或所述
fab'
的所述
pd-l1
结合结构域包含
fab
重链多肽和
fab
轻链多肽,所述
fab
重链多肽包含
fab
重链可变结构域,所述
fab
轻链多肽包含
fab
轻链可变结构域

[0497]
实施方案
12
包括如实施方案
10
所述的多特异性抗体,其中包含所述单链可变片段的所述
cd28
结合结构域包含
scfv
重链可变结构域和
scfv
轻链可变结构域

[0498]
实施方案
13
包括如实施方案
1-12
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的c末端与b的n末端

[0499]
实施方案
14
包括如实施方案
1-12
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的n末端与b的c末端

[0500]
实施方案
15
包括如实施方案
11

12
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的c末端与所述
fab
重链多肽的n末端

[0501]
实施方案
16
包括如实施方案
11

12
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的n末端与所述
fab
重链多肽的c末端

[0502]
实施方案
17
包括如实施方案
11

12
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的c末端与所述
fab
轻链多肽的n末端

[0503]
实施方案
18
包括如实施方案
11

12
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的n末端与所述
fab
轻链多肽的c末端

[0504]
实施方案
19
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域

[0505]
实施方案
20
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域

[0506]
实施方案
21
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域

[0507]
实施方案
22
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域

[0508]
实施方案
23
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的n末端

[0509]
实施方案
24
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端

[0510]
实施方案
25
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的n末端

[0511]
实施方案
26
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的c末端

[0512]
实施方案
27
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的n末端

[0513]
实施方案
28
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端

[0514]
实施方案
29
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的n末端

[0515]
实施方案
30
包括如实施方案
12
所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的c末端

[0516]
实施方案
31
包括如实施方案
3-30
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度是至少5个氨基酸

[0517]
实施方案
32
包括如实施方案
3-31
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度不超过
30
个氨基酸

[0518]
实施方案
33
包括如实施方案
3-32
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度是至少5个氨基酸且不超过
30
个氨基酸

[0519]
实施方案
34
包括如实施方案
3-33
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度是5个氨基酸

[0520]
实施方案
35
包括如实施方案
3-33
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度是
15
个氨基酸

[0521]
实施方案
36
包括如实施方案
3-30
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头选自
(g2s)n、(gs)n、(gsggs)n(seq id no:58)、(gggs)n(seq id no:59)、(ggggs)n(seq id no:60)

(gssggs)n(seq id no:61)
,其中n是至少1的整数

[0522]
实施方案
37
包括如实施方案
3-30
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l
具有包括
(g2s
)n
(seq id no:233)
的式,其中n是1至3的整数

[0523]
实施方案
38
包括如实施方案
3-30
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
l
包含
seq id no:18(ggggsggggsggggs)

seq id no:19(ggggs)
的氨基酸序列

[0524]
实施方案
39
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
scfv
重链可变结构域的所述
hc-cdr1、
所述
hc-cdr2
和所述
hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:1

hc-cdr2

seq id no:2

hc-cdr3

seq id no:3
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0525]
实施方案
40
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
scfv
轻链可变结构域的所述
lc-cdr1、
所述
lc-cdr2
和所述
lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:4

lc-cdr2

seq id no:5
;和
lc-cdr3

seq id no:6
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0526]
实施方案
41
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
fab
重链可变结构域的所述
hc-cdr1、
所述
hc-cdr2
和所述
hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:10

hc-cdr2

seq id no:11

hc-cdr3

seq id no:12

hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26
;或
hc-cdr1

seq id no:27

hc-cdr2

seq id no:28

hc-cdr3

seq id no:29
;或
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32
;并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0527]
实施方案
42
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
fab
轻链可变
结构域的所述
lc-cdr1、
所述
lc-cdr2
和所述
lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15

lc-cdr1

seq id no:33

lc-cdr2

seq id no:34
;和
lc-cdr3

seq id no:35

lc-cdr1

seq id no:36

lc-cdr2

seq id no:37
;和
lc-cdr3

seq id no:38
;或
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0528]
实施方案
43
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0529]
实施方案
44
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0530]
实施方案
45
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0531]
实施方案
46
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的所述至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0532]
实施方案
47
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含根据
seq id no:7
的氨基酸序列

[0533]
实施方案
48
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0534]
实施方案
49
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0535]
实施方案
50
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0536]
实施方案
51
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的所述至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0537]
实施方案
52
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含根据
seq id no:8
的氨基酸序列

[0538]
实施方案
53
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0539]
实施方案
54
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0540]
实施方案
55
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0541]
实施方案
56
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的所述至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0542]
实施方案
57
包括如实施方案
11-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含根据
seq id no:9
的氨基酸序列

[0543]
实施方案
58
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17、43、45

47
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0544]
实施方案
59
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17、43、45

47
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0545]
实施方案
60
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17、43、45

47
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0546]
实施方案
61
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17、43、45

47
的所述至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0547]
实施方案
62
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:17、43、45

47
的氨基酸序列

[0548]
实施方案
63
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16、42、44

46
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0549]
实施方案
64
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16、42、44

46
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0550]
实施方案
65
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16、42、44

46
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0551]
实施方案
66
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16、42、44

46
的所述至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0552]
实施方案
67
包括如实施方案
11-57
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:16、42、44

46
的氨基酸序列

[0553]
实施方案
68
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0554]
实施方案
69
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0555]
实施方案
70
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:20
的所述
至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:21
的所述至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0556]
实施方案
71
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:20
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的氨基酸序列

[0557]
实施方案
72
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0558]
实施方案
73
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0559]
实施方案
74
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的所述至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的所述至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0560]
实施方案
75
包括如实施方案
12-38
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:23
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的氨基酸序列

[0561]
实施方案
76
包括一种多特异性抗体,其包含
cd28
结合结构域和
pd-l1
结合结构域,其中所述多特异性抗体在肿瘤微环境中被选择性激活

[0562]
实施方案
77
包括如实施方案
76
所述的多特异性抗体,其中所述
cd28
结合结构域包含单链可变片段

单结构域抗体
、fab

fab'。
[0563]
实施方案
78
包括如实施方案
77
所述的多特异性抗体,其中所述
cd28
结合结构域包含所述单链可变片段

[0564]
实施方案
79
包括如实施方案
77
所述的多特异性抗体,其中所述
cd28
结合结构域包含所述单结构域抗体

[0565]
实施方案
80
包括如实施方案
77
所述的多特异性抗体,其中所述
cd28
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'。
[0566]
实施方案
81
包括如实施方案
76-81
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
pd-l1
结合结构域包含单链可变片段

单结构域抗体
、fab

fab'。
[0567]
实施方案
82
包括如实施方案
81
所述的多特异性抗体,其中所述
pd-l1
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'。
[0568]
实施方案
83
包括如实施方案
81
所述的多特异性抗体,其中所述
pd-l1
结合结构域包含所述
fab
或所述
fab'
,并且所述
cd28
结合结构域包含所述单链可变片段

[0569]
实施方案
84
包括如实施方案
81-83
中任一项所述的多特异性抗体,其中包含所述
fab
或所述
fab'
的所述
pd-l1
结合结构域包含
fab
重链多肽和
fab
轻链多肽,所述
fab
重链多肽包含
fab
重链可变结构域,所述
fab
轻链多肽包含
fab
轻链可变结构域

[0570]
实施方案
85
包括如实施方案
77-78

80-84
中任一项所述的多特异性抗体,其中包含所述单链可变片段的所述
cd28
结合结构域包含
scfv
重链可变结构域和
scfv
轻链可变结构域

[0571]
实施方案
86
包括如实施方案
76-85
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述多特异性抗体是根据下式:
p
1-l
1-a-l-b(

ia)
,其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;
l
包含连接a与b的接头;
p1包含与a结合的肽,并且
l1包含连接a与
p1的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0572]
实施方案
87
包括如实施方案
76-85
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述多特异性抗体是根据下式:
a-l-b-l
2-p2(

ib)
,其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;
l
包含连接a与b的接头;
p2包含与b结合的肽,并且
l2包含连接b与
p2的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0573]
实施方案
88
包括如实施方案
76-85
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述多特异性抗体是根据下式:
p
1-l
1-a-l-b-l
2-p2(

ic)
,其中a包含所述
cd28
结合结构域;b包含所述
pd-l1
结合结构域;
l
包含连接a与b的接头;
p1
包含与a结合的肽,并且
l1包含连接a与
p1的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物;
p2包含与b结合的肽,并且
l2包含连接b与
p2的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0574]
实施方案
89
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的c末端与b的n末端

[0575]
实施方案
90
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的n末端与b的c末端

[0576]
实施方案
91
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的c末端与所述
fab
重链多肽的n末端

[0577]
实施方案
92
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的n末端与所述
fab
重链多肽的c末端

[0578]
实施方案
93
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的c末端与所述
fab
轻链多肽的n末端

[0579]
实施方案
94
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接a的n末端与所述
fab
轻链多肽的c末端

[0580]
实施方案
95
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域

[0581]
实施方案
96
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域

[0582]
实施方案
97
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域

[0583]
实施方案
98
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域

[0584]
实施方案
99
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的n末端

[0585]
实施方案
100
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端

[0586]
实施方案
101
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的n末端

[0587]
实施方案
102
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的c末端

[0588]
实施方案
103
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的n末端

[0589]
实施方案
104
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端

[0590]
实施方案
105
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的n末端

[0591]
实施方案
106
包括如实施方案
86-88
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
重链可变结构域的c末端

[0592]
实施方案
107
包括如实施方案
86-106
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度是至少5个氨基酸

[0593]
实施方案
108
包括如实施方案
86-107
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度不超过
30
个氨基酸

[0594]
实施方案
109
包括如实施方案
86-108
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度是至少5个氨基酸且不超过
30
个氨基酸

[0595]
实施方案
110
包括如实施方案
86-109
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度是5个氨基酸

[0596]
实施方案
111
包括如实施方案
86-109
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头的长度是
15
个氨基酸

[0597]
实施方案
112
包括如实施方案
86-109
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头选自
(g2s)n、(gs)n、(gsggs)n(seq id no:58)、(gggs)n(seq id no:59)、(ggggs)n(seq id no:60)

(gssggs)n(seq id no:61)
,其中n是至少1的整数

[0598]
实施方案
113
包括如实施方案
86-109
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l
具有包括
(g2s)n(seq id no:233)
的式,其中n是1至3的整数

[0599]
实施方案
114
包括如实施方案
86-109
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
l
包含
seq id no:18(ggggsggggsggggs)

seq id no:19(ggggs)
的氨基酸序列

[0600]
实施方案
115
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
scfv
重链可变结构域的所述
hc-cdr1、
所述
hc-cdr2
和所述
hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:1

hc-cdr2

seq id no:2

hc-cdr3

seq id no:3
,并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0601]
实施方案
116
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
scfv
轻链可变结构域的所述
lc-cdr1、
所述
lc-cdr2
和所述
lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:4

lc-cdr2

seq id no:5
;和
lc-cdr3

seq id no:6
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0602]
实施方案
117
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述
fab
重链可变结构域的所述
hc-cdr1、
所述
hc-cdr2
和所述
hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:10

hc-cdr2

seq id no:11

hc-cdr3

seq id no:12

hc-cdr1

seq id no:24

hc-cdr2

seq id no:25

hc-cdr3

seq id no:26
;或
hc-cdr1

seq id no:27

hc-cdr2

seq id no:28

hc-cdr3

seq id no:29
;或
hc-cdr1

seq id no:30

hc-cdr2

seq id no:31

hc-cdr3

seq id no:32
;并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0603]
实施方案
118
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链可变结构域包含互补决定区
(cdr)

lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
fab
轻链可变结构域的所述
lc-cdr1、
所述
lc-cdr2
和所述
lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:13

lc-cdr2

seq id no:14
;和
lc-cdr3

seq id no:15

lc-cdr1

seq id no:33

lc-cdr2

seq id no:34
;和
lc-cdr3

seq id no:35

lc-cdr1

seq id no:36

lc-cdr2

seq id no:37
;和
lc-cdr3

seq id no:38
;或
lc-cdr1

seq id no:39

lc-cdr2

seq id no:40
;和
lc-cdr3

seq id no:41
,并且其中所述
cdr
在所述
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0604]
实施方案
119
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含与根据
seq id no:7
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0605]
实施方案
120
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0606]
实施方案
121
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0607]
实施方案
122
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含
seq id no:7
的至少
110
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:7
的所述至少
110
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0608]
实施方案
123
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
重链可变结构域包含根据
seq id no:7
的氨基酸序列

[0609]
实施方案
124
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含与根据
seq id no:8
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0610]
实施方案
125
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
75
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0611]
实施方案
126
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0612]
实施方案
127
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含
seq id no:8
的至少
100
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:8
的所述至少
100
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0613]
实施方案
128
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
轻链可变结构域包含根据
seq id no:8
的氨基酸序列

[0614]
实施方案
129
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含与根据
seq id no:9
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0615]
实施方案
130
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0616]
实施方案
131
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0617]
实施方案
132
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含
seq id no:9
的至少
210
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:9
的所述至少
210
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0618]
实施方案
133
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
scfv
包含根据
seq id no:9
的氨基酸序列

[0619]
实施方案
134
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:17、43、45

47
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0620]
实施方案
135
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17、43、45

47
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0621]
实施方案
136
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17、43、45

47
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0622]
实施方案
137
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:17
的至少
215
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:17、43、45

47
的所述至少
215
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0623]
实施方案
138
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:17、43、45

47
的氨基酸序列

[0624]
实施方案
139
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:16、42、44

46
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0625]
实施方案
140
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16、42、44

46
的至少
175
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0626]
实施方案
141
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16、42、44

46
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0627]
实施方案
142
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:16
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:16、42、44

46
的所述至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0628]
实施方案
143
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:16、42、44

46
的氨基酸序列

[0629]
实施方案
144
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含与根据
seq id no:20
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:21
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0630]
实施方案
145
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0631]
实施方案
146
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含
seq id no:20
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:20
的所述至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:21
的所述至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0632]
实施方案
147
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
重链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
轻链多肽包含根据
seq id no:20
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
重链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:21
的氨基酸序列

[0633]
实施方案
148
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含与根据
seq id no:23
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含与根据
seq id no:22
的氨基酸序列具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0634]
实施方案
149
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列

[0635]
实施方案
150
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接
头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含
seq id no:23
的至少
200
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:23
的所述至少
200
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的至少
450
个连续氨基酸残基的氨基酸序列,并且与
seq id no:22
的所述至少
450
个连续氨基酸残基具有至少
80
%序列同一性

[0636]
实施方案
151
包括如实施方案
86-114
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述接头连接所述
fab
轻链多肽与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端,并且其中所述
fab
重链多肽包含根据
seq id no:23
的氨基酸序列,并且与所述
scfv
轻链可变结构域的c末端连接的所述
fab
轻链多肽的氨基酸序列包含
seq id no:22
的氨基酸序列

[0637]
实施方案
152
包括如实施方案
86-151
中任一项所述的多特异性抗体,其中式
ia、

ib、

ic
的所述多特异性抗体还包含半衰期延长分子
(h1)。
[0638]
实施方案
153
包括如实施方案
152
所述的多特异性抗体,其中
h1与
p1连接

[0639]
实施方案
154
包括如实施方案
152
所述的多特异性抗体,其中
h1与
p2连接

[0640]
实施方案
155
包括如实施方案
152-154
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1不阻断a与
cd28
结合

[0641]
实施方案
156
包括如实施方案
152-155
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1不阻断b与
pd-l1
结合

[0642]
实施方案
157
包括如实施方案
152-156
中任一项所述的多特异性抗体,
h1包含连接
h1与
p1或
h1与
p2的连接部分
(l5)。
[0643]
实施方案
158
包括如实施方案
152-157
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述半衰期延长分子
(h
1)
不具有与
pd-l1
的结合亲和力

[0644]
实施方案
159
包括如实施方案
152-158
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述半衰期延长分子
(h1)
不具有与
cd28
的结合亲和力

[0645]
实施方案
160
包括如实施方案
152-159
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述半衰期延长分子
(h1)
不使所述多特异性抗体免受
cd28
的作用

[0646]
实施方案
161
包括如实施方案
152-160
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1包含根据
seq id no:54-57
的序列

[0647]
实施方案
162
包括如实施方案
152-161
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1包含具有重复序列基序的氨基酸序列

[0648]
实施方案
163
包括如实施方案
152-162
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1包含具有高度有序的二级结构的氨基酸序列

[0649]
实施方案
164
包括如实施方案
152-163
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1包含聚合物

[0650]
实施方案
165
包括如实施方案
164
所述的多特异性抗体,其中所述聚合物是聚乙二醇
(peg)。
[0651]
实施方案
166
包括如实施方案
152-163
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1包含白蛋白

[0652]
实施方案
167
包括如实施方案
152-163
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1包含
fc
结构域

[0653]
实施方案
168
包括如实施方案
166
所述的多特异性抗体,其中所述白蛋白是血清白蛋白

[0654]
实施方案
169
包括如实施方案
168
所述的多特异性抗体,其中所述白蛋白是人血清白蛋白

[0655]
实施方案
170
包括如实施方案
152-163
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1包含多肽

配体或小分子

[0656]
实施方案
171
包括如实施方案
170
所述的多特异性抗体,其中所述多肽

所述配体或所述小分子结合血清蛋白或其片段

循环免疫球蛋白或其片段


cd35/cr1。
[0657]
实施方案
172
包括如实施方案
170
所述的多特异性抗体,其中所述血清蛋白包括甲状腺素结合蛋白

甲状腺素转运蛋白
、1-酸糖蛋白

转铁蛋白

转铁蛋白受体或其转铁蛋白结合部分

纤维蛋白原或白蛋白

[0658]
实施方案
173
包括如实施方案
171
所述的多特异性抗体,其中所述循环免疫球蛋白分子包括
iggl、igg2、igg3、igg4、slga、igm

igd。
[0659]
实施方案
174
包括如实施方案
171
所述的多特异性抗体,其中所述血清蛋白是白蛋白

[0660]
实施方案
175
包括如实施方案
170
所述的多特异性抗体,其中所述多肽是抗体

[0661]
实施方案
176
包括如实施方案
175
所述的多特异性抗体,其中所述抗体包括单结构域抗体

单链可变片段或
fab。
[0662]
实施方案
177
包括如实施方案
176
所述的多特异性抗体,其中所述单结构域抗体包括与白蛋白结合的单结构域抗体

[0663]
实施方案
178
包括如实施方案
177
所述的多特异性抗体,其中所述单结构域抗体是人或人源化抗体

[0664]
实施方案
179
包括如实施方案
176-178
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述单结构域抗体选自
645gh1gl1、645dsgh5gl4、23-13-a01-sc02、a10m3
或其片段
、dom7r-31、dom7h-11-15、alb-1、alb-8、alb-23、10g、10e

sa21。
[0665]
实施方案
180
包括如实施方案
176
所述的多特异性抗体,其中所述单结构域抗体包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述单结构域抗体的所述
hc-cdr1、
所述
hc-cdr2
和所述
hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:54

hc-cdr2

seq id no:55
;和
hc-cdr3

seq id no:56
;并且其中所述
cdr
在所述
hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
中的至少一个中包含
0-2
个氨基酸修饰

[0666]
实施方案
181
包括如实施方案
176
所述的多特异性抗体,其中
h1包含根据
seq id no:57
的氨基酸序列

[0667]
实施方案
182
包括如实施方案
176
所述的多特异性抗体,其中
h1包含与
seq id no:57
具有至少
80
%序列同一性的氨基酸序列

[0668]
实施方案
183
包括如实施方案
176
所述的多特异性抗体,其中
h1包含与
seq id no:57
具有至少
85
%序列同一性的氨基酸序列

[0669]
实施方案
184
包括如实施方案
176
所述的多特异性抗体,其中
h1包含与
seq id no:57
具有至少
90
%序列同一性的氨基酸序列

[0670]
实施方案
185
包括如实施方案
176
所述的多特异性抗体,其中
h1包含与
seq id no:57
具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

[0671]
实施方案
186
包括如实施方案
176
所述的多特异性抗体,其中
h1包含与
seq id no:57
具有至少
99
%序列同一性的氨基酸序列

[0672]
实施方案
187
包括如实施方案
152-186
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1包含经修饰的氨基酸或非天然氨基酸

或经修饰的非天然氨基酸或其组合

[0673]
实施方案
188
包括如实施方案
187
所述的多特异性抗体,其中所述经修饰的氨基酸或经修饰的非天然氨基酸包含翻译后修饰

[0674]
实施方案
189
包括如实施方案
152-188
中任一项所述的多特异性抗体,其中
h1包含连接
h1与
p1或
p2的连接部分
(l5)。
[0675]
实施方案
190
包括如实施方案
189
所述的多特异性抗体,其中
l5是具有至少5个至不超过
50
个氨基酸的肽序列

[0676]
实施方案
191
包括如实施方案
190
所述的多特异性抗体,其中
l5是具有至少
10
个至不超过
30
个氨基酸的肽序列

[0677]
实施方案
192
包括如实施方案
191
所述的多特异性抗体,其中
l5是具有至少
10
个氨基酸的肽序列

[0678]
实施方案
193
包括如实施方案
192
所述的多特异性抗体,其中
l5是具有至少
18
个氨基酸的肽序列

[0679]
实施方案
194
包括如实施方案
193
所述的多特异性抗体,其中
l5是具有至少
26
个氨基酸的肽序列

[0680]
实施方案
195
包括如实施方案
189
所述的多特异性抗体,其中
l5具有选自以下的式:
(g2s)n、(gs)n、(gsggs)n(seq id no:58)、(gggs)n(seq id no:59)、(ggggs)n(seq id no:60)

(gssggs)n(seq id no:61)
,其中n是至少1的整数

[0681]
实施方案
196
包括如实施方案
86-195
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2是具有至少5个至不超过
50
个氨基酸的肽序列

[0682]
实施方案
197
包括如实施方案
86-195
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2是具有至少
10
个至不超过
30
个氨基酸的肽序列

[0683]
实施方案
198
包括如实施方案
86-195
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2是具有至少
10
个氨基酸的肽序列

[0684]
实施方案
199
包括如实施方案
86-195
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2是具有至少
18
个氨基酸的肽序列

[0685]
实施方案
200
包括如实施方案
86-195
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2是具有至少
26
个氨基酸的肽序列

[0686]
实施方案
201
包括如实施方案
86-195
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2具有包括
(g2s)n(seq id no:233)
的式,其中n是1至3的整数

[0687]
实施方案
202
包括如实施方案
86-195
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2具有包括
(g2s)n
的式,其中n是至少1的整数

[0688]
实施方案
203
包括如实施方案
86-195
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2具有选自以下的式:
(g2s)n、(gs)n、(gsggs)n(seq id no:58)、(gggs)n(seq id no:59)、
(ggggs)n(seq id no:60)

(gssggs)n(seq id no:61)
,其中n是至少1的整数

[0689]
实施方案
204
包括如实施方案
86-203
中任一项所述的多特异性抗体,其中所述肿瘤特异性蛋白酶选自金属蛋白酶

丝氨酸蛋白酶

半胱氨酸蛋白酶

苏氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶

[0690]
实施方案
205
包括如实施方案
86-203
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2包含尿激酶可切割氨基酸序列

蛋白裂解酶可切割氨基酸序列

豆荚蛋白可切割氨基酸序列或基质金属蛋白酶可切割氨基酸序列

[0691]
实施方案
206
包括如实施方案
86-205
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2包含根据
seq id no:18-19、62-88
的序列

[0692]
实施方案
207
包括如实施方案
86-206
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1与a的n末端结合

[0693]
实施方案
208
包括如实施方案
86-206
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1与a的c末端结合

[0694]
实施方案
209
包括如实施方案
86-206
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l2与b的n末端结合

[0695]
实施方案
210
包括如实施方案
86-206
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l2与b的c末端结合

[0696]
实施方案
211
包括如实施方案
86-206
中任一项所述的多特异性抗体,其中当
l1通过所述肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p1不再与a结合,从而将a暴露于
cd28。
[0697]
实施方案
212
包括如实施方案
86-206
中任一项所述的多特异性抗体,其中当
l2通过所述肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p2不再与b结合,从而将b暴露于
pd-l1。
[0698]
实施方案
213
包括如实施方案
86-213
中任一项所述的多特异性抗体,其中
l1或
l2包含经修饰的氨基酸或非天然氨基酸

或经修饰的非天然氨基酸或其组合

[0699]
实施方案
214
包括如实施方案
213
所述的多特异性抗体,其中所述经修饰的氨基酸或经修饰的非天然氨基酸包含翻译后修饰

[0700]
实施方案
215
包括如实施方案
86-214
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1削弱a与
cd28
的结合

[0701]
实施方案
216
包括如实施方案
86-215
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1通过离子相互作用

静电相互作用

疏水相互作用

π
堆积相互作用和h键相互作用或其组合与a结合

[0702]
实施方案
217
包括如实施方案
86-216
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1在抗原结合位点处或附近与a结合

[0703]
实施方案
218
包括如实施方案
86-217
中任一项所述的多特异性抗体,其中当
l1
通过所述肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p1不再与a结合,从而将a暴露于
cd28。
[0704]
实施方案
219
包括如实施方案
86-218
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1与
cd28
具有小于
75
%的序列同一性

[0705]
实施方案
220
包括如实施方案
86-218
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1与
cd28
具有小于
80
%的序列同一性

[0706]
实施方案
221
包括如实施方案
86-218
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1与
cd28
具有小于
85
%的序列同一性

[0707]
实施方案
222
包括如实施方案
86-218
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1与
cd28
具有小于
90
%的序列同一性

[0708]
实施方案
223
包括如实施方案
86-218
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1与
cd28
具有小于
95
%的序列同一性

[0709]
实施方案
224
包括如实施方案
86-218
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1包含与
cd28
共享小于
10
%的序列同一性的全新氨基酸序列

[0710]
实施方案
225
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2削弱b与
pd-l1
的结合

[0711]
实施方案
226
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2通过离子相互作用

静电相互作用

疏水相互作用

π
堆积相互作用和h键相互作用或其组合与b结合

[0712]
实施方案
227
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2在抗原结合位点处或附近与b结合

[0713]
实施方案
228
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中当
l2通过所述肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p2不再与b结合,从而将b暴露于所述
pd-l1。
[0714]
实施方案
229
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2与所述
pd-l1
具有小于
70
%的序列同一性

[0715]
实施方案
230
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2与所述
pd-l1
具有小于
75
%的序列同一性

[0716]
实施方案
231
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2与所述
pd-l1
具有小于
80
%的序列同一性

[0717]
实施方案
232
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2与所述
pd-l1
具有小于
85
%的序列同一性

[0718]
实施方案
233
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2与所述
pd-l1
具有小于
90
%的序列同一性

[0719]
实施方案
234
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2与所述
pd-l1
具有小于
95
%的序列同一性

[0720]
实施方案
235
包括如实施方案
87-224
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p2包含与所述
pd-l1
共享小于
10
%的序列同一性的全新氨基酸序列

[0721]
实施方案
236
包括如实施方案
86-235
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含长度为至少5个氨基酸的肽序列

[0722]
实施方案
237
包括如实施方案
86-235
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含长度为至少6个氨基酸的肽序列

[0723]
实施方案
238
包括如实施方案
86-235
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含长度为至少
10
个氨基酸的肽序列

[0724]
实施方案
239
包括如实施方案
86-235
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含长度为至少
10
个氨基酸且长度不超过
20
个氨基酸的肽序列

[0725]
实施方案
240
包括如实施方案
86-235
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包
含长度为至少
16
个氨基酸的肽序列

[0726]
实施方案
241
包括如实施方案
86-235
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含长度不超过
40
个氨基酸的肽序列

[0727]
实施方案
242
包括如实施方案
86-241
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含至少两个半胱氨酸氨基酸残基

[0728]
实施方案
243
包括如实施方案
86-242
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含环状肽或线性肽

[0729]
实施方案
244
包括如实施方案
86-242
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含环状肽

[0730]
实施方案
245
包括如实施方案
86-242
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含线性肽

[0731]
实施方案
246
包括如实施方案
86-245
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1或
p2包含经修饰的氨基酸或非天然氨基酸

或经修饰的非天然氨基酸或其组合

[0732]
实施方案
247
包括如实施方案
86-246
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1

p2不包含白蛋白或白蛋白片段

[0733]
实施方案
248
包括如实施方案
86-247
中任一项所述的多特异性抗体,其中
p1

p2不包含白蛋白结合结构域

[0734]
实施方案
249
包括一种分离的重组核酸分子,其编码如实施方案
1-248
中任一项所述的多特异性抗体的多肽

[0735]
实施方案
250
包括一种药物组合物,其包含:
(a)
如实施方案
1-248
中任一项所述的多特异性抗体;和
(b)
药学上可接受的赋形剂

[0736]
实施方案
251
包括一种药物组合物,其包含:
(a)
如实施方案
1-248
中任一项所述的多特异性抗体,
(b)
抗癌疗法,和
(c)
药学上可接受的赋形剂

[0737]
实施方案
252
包括如实施方案
251
所述的药物组合物,其中所述抗癌疗法包括小分子疗法

基于细胞的疗法或基于抗体的疗法

[0738]
实施方案
253
包括如实施方案
252
所述的药物组合物,其中所述基于抗体的疗法是
t
细胞接合器

[0739]
实施方案
254
包括如实施方案
253
所述的药物组合物,其中所述
t
细胞接合器具有根据以下的式:
d-l
0-e(

ii)
,其中d包含与效应细胞抗原结合的效应细胞结合结构域,e包含与肿瘤抗原结合的肿瘤抗原结合结构域,并且
l0包含连接d与e的接头

[0740]
实施方案
255
包括如实施方案
254
所述的药物组合物,其中d包含单链可变片段

单结构域抗体或
fab
片段

[0741]
实施方案
256
包括如实施方案
255
所述的药物组合物,其中d包含所述单链可变片段

[0742]
实施方案
257
包括如实施方案
254-256
中任一项所述的药物组合物,其中e包含单链可变片段

单结构域抗体或
fab
片段

[0743]
实施方案
258
包括如实施方案
257
所述的药物组合物,其中e包含所述
fab
片段

[0744]
实施方案
259
包括如实施方案
254-258
中任一项所述的药物组合物,其中所述效应细胞抗原包含
cd3。
[0745]
实施方案
260
包括如实施方案
259
所述的药物组合物,其中所述效应细胞结合结构域包含选自以下的互补决定区
(cdr)
:莫罗单抗-cd3(okt3)、
奥昔组单抗
(trx4)、
替利组单抗
(mga031)、
维西珠单抗
(nuvion)、sp34、x35、vit3、bma030(bw264/56)、clb-t3/3、cris7、yth12.5、f111-409、clb-t3.4.2、tr-66、wt32、spv-t3b、11d8、xiii-141、xiii-46、xiii-87、12f6、t3/rw2-8c8、t3/rw2-4b6、okt3d、m-t301、smc2、f101.01、ucht-1、wt-31、15865、15865v12、15865v16

15865v19。
[0746]
实施方案
261
包括如实施方案
259
所述的药物组合物,其中所述效应细胞结合结构域包含根据
seq id no:89-101
的氨基酸序列

[0747]
实施方案
262
包括如实施方案
254-261
中任一项所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括表皮生长因子受体
(egfr)、
前列腺特异性膜抗原
(psma)
或肿瘤相关钙信号转导蛋白
2(
在本文中被称为
trop2)。
[0748]
实施方案
263
包括如实施方案
262
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
egfr。
[0749]
实施方案
264
包括如实施方案
263
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原结合结构域包含根据
seq id no:102-111
的氨基酸序列

[0750]
实施方案
265
包括如实施方案
263
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
egfr
,并且所述肿瘤结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
以及
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
hc-cdr1、
所述
hc-cdr2
和所述
hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:105

hc-cdr2

seq id no:106

hc-cdr3

seq id no:107
;并且其中所述
lc-cdr1、
所述
lc-cdr2
和所述
lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:102

lc-cdr2

seq id no:103
;和
lc-cdr3

seq id no:104。
[0751]
实施方案
266
包括如实施方案
263
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
egfr
,并且所述
t
细胞接合器包含与
seq id no:139-142
具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

[0752]
实施方案
267
包括如实施方案
263
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
egfr
,并且所述
t
细胞接合器包含根据
seq id no:139-142
的氨基酸序列

[0753]
实施方案
268
包括如实施方案
262
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
trop2。
[0754]
实施方案
269
包括如实施方案
268
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
trop2
,并且所述肿瘤结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
以及
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
hc-cdr1、
所述
hc-cdr2
和所述
hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:112

hc-cdr2

seq id no:113

hc-cdr3

seq id no:114
;并且其中所述
lc-cdr1、
所述
lc-cdr2
和所述
lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:115

lc-cdr2

seq id no:116
;和
lc-cdr3

seq id no:117。
[0755]
实施方案
270
包括如实施方案
268
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
trop2
,并且所述
t
细胞接合器包含与
seq id no:143-150
具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

[0756]
实施方案
271
包括如实施方案
268
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
trop2
,并且所述
t
细胞接合器包含根据
seq id no:143-150
的氨基酸序列

[0757]
实施方案
272
包括如实施方案
268
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原结合结构域包含根据
seq id no:112-119
的氨基酸序列

[0758]
实施方案
273
包括如实施方案
262
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
psma。
[0759]
实施方案
274
包括如实施方案
273
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原结合结构域包含根据
seq id no:120-127
的氨基酸序列

[0760]
实施方案
275
包括如实施方案
273
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
psma
,并且所述肿瘤结合结构域包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
以及
lc-cdr1、lc-cdr2

lc-cdr3
,其中所述
hc-cdr1、
所述
hc-cdr2
和所述
hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:120

hc-cdr2

seq id no:121

hc-cdr3

seq id no:122
;并且其中所述
lc-cdr1、
所述
lc-cdr2
和所述
lc-cdr3
包括:
lc-cdr1

seq id no:123

lc-cdr2

seq id no:124
;和
lc-cdr3

seq id no:125。
[0761]
实施方案
276
包括如实施方案
273
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
psma
,并且所述
t
细胞接合器包含与
seq id no:151-160
具有至少
95
%序列同一性的氨基酸序列

[0762]
实施方案
277
包括如实施方案
273
所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
psma
,并且所述
t
细胞接合器包含根据
seq id no:151-160
的氨基酸序列

[0763]
实施方案
278
包括如实施方案
253-277
中任一项所述的药物组合物,其中所述
t
细胞接合器分子在肿瘤微环境中被选择性激活

[0764]
实施方案
279
包括如实施方案
253-278
中任一项所述的药物组合物,其中所述
t
细胞接合器是根据下式:
p
3-l
3-d-l
0-e(

iia)
,其中d包含所述
cd3
结合结构域;e包含所述肿瘤抗原结合结构域;
l0
包含连接d与e的所述接头;
p3包含与d结合的肽,并且
l3包含连接d与
p3的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0765]
实施方案
280
包括如实施方案
253-278
中任一项所述的药物组合物,其中所述
t
细胞接合器是根据下式:
d-l
0-e-l
4-p4(

iib)
,其中d包含所述
cd3
结合结构域;e包含所述肿瘤抗原结合结构域;
l0
包含连接d与e的所述接头;
p4
包含与e结合的肽,并且
l4
包含连接d与
p4
的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0766]
实施方案
281
包括如实施方案
253-278
中任一项所述的药物组合物,其中所述
t
细胞接合器是根据下式:
p
3-l
3-d-l
0-e-l
4-p4(

iic)
,其中d包含所述
cd3
结合结构域;e包含所述肿瘤抗原结合结构域;
l0
包含连接d与e的所述接头;
p3包含与d结合的肽,并且
l3包含连接d与
p3的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物;
p4包含与e结合的肽,并且
l4包含连接e与
p4的连接部分并且是肿瘤特异性蛋白酶的底物

[0767]
实施方案
282
包括如实施方案
253-281
中任一项所述的药物组合物,其中所述
t
细胞接合器包含
h1。
[0768]
实施方案
283
包括如实施方案
282
所述的药物组合物,其中
h1包含根据
seq id no:54-57
的序列

[0769]
实施方案
284
包括如实施方案
282-283
中任一项所述的药物组合物,其中
h1包含单结构域抗体

[0770]
实施方案
285
包括如实施方案
282-284
中任一项所述的药物组合物,其中所述单结
构域抗体包含互补决定区
(cdr)

hc-cdr1、hc-cdr2

hc-cdr3
,其中所述单结构域抗体的所述
hc-cdr1、
所述
hc-cdr2
和所述
hc-cdr3
包括:
hc-cdr1

seq id no:54

hc-cdr2

seq id no:55
;和
hc-cdr3

seq id no:56。
[0771]
实施方案
286
包括如实施方案
279-285
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4是具有至少5个至不超过
50
个氨基酸的肽序列

[0772]
实施方案
287
包括如实施方案
279-285
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4是具有至少
10
个至不超过
30
个氨基酸的肽序列

[0773]
实施方案
288
包括如实施方案
279-285
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4是具有至少
10
个氨基酸的肽序列

[0774]
实施方案
289
包括如实施方案
279-285
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4是具有至少
18
个氨基酸的肽序列

[0775]
实施方案
290
包括如实施方案
279-285
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4是具有至少
26
个氨基酸的肽序列

[0776]
实施方案
291
包括如实施方案
279-285
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4具有包括
(g2s)n(seq id no:233)
的式,其中n是1至3的整数

[0777]
实施方案
292
包括如实施方案
279-285
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4具有包括
(g2s)n的式,其中n是至少1的整数

[0778]
实施方案
293
包括如实施方案
279-285
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4具有选自以下的式:
(g2s)n、(gs)n、(gsggs)n(seq id no:58)、(gggs)n(seq id no:59)、(ggggs)n(seq id no:60)

(gssggs)n(seq id no:61)
,其中n是至少1的整数

[0779]
实施方案
294
包括如实施方案
279-293
中任一项所述的药物组合物,其中所述肿瘤特异性蛋白酶选自金属蛋白酶

丝氨酸蛋白酶

半胱氨酸蛋白酶

苏氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶

[0780]
实施方案
295
包括如实施方案
279-293
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4包含尿激酶可切割氨基酸序列

蛋白裂解酶可切割氨基酸序列

豆荚蛋白可切割氨基酸序列或基质金属蛋白酶可切割氨基酸序列

[0781]
实施方案
296
包括如实施方案
279-295
中任一项所述的药物组合物,其中
l3或
l4包含根据
seq id no:18-19、62-88
的序列

[0782]
实施方案
297
包括如实施方案
279-296
中任一项所述的药物组合物,其中
l3与d的n末端结合

[0783]
实施方案
298
包括如实施方案
279-296
中任一项所述的药物组合物,其中
l3与d的c末端结合

[0784]
实施方案
299
包括如实施方案
279-296
中任一项所述的药物组合物,其中
l4与e的n末端结合

[0785]
实施方案
300
包括如实施方案
279-296
中任一项所述的药物组合物,其中
l4与e的c末端结合

[0786]
实施方案
301
包括如实施方案
279-300
中任一项所述的药物组合物,其中当
l3通过所述肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p3不再与d结合,从而将d暴露于
cd3。
[0787]
实施方案
302
包括如实施方案
279-301
中任一项所述的药物组合物,其中当
l4通过
所述肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p4不再与e结合,从而将e暴露于所述肿瘤抗原

[0788]
实施方案
303
包括如实施方案
279-302
中任一项所述的药物组合物,其中
p3削弱d与
cd3
的结合

[0789]
实施方案
304
包括如实施方案
279-303
中任一项所述的药物组合物,其中
p3通过离子相互作用

静电相互作用

疏水相互作用

π
堆积相互作用和h键相互作用或其组合与d结合

[0790]
实施方案
305
包括如实施方案
279-304
中任一项所述的药物组合物,其中
p3在抗原结合位点处或附近与d结合

[0791]
实施方案
306
包括如实施方案
279-305
中任一项所述的药物组合物,其中当
l3通过所述肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p3不再与d结合,从而将d暴露于
cd3。
[0792]
实施方案
307
包括如实施方案
279-306
中任一项所述的药物组合物,其中
p3与
cd3
具有小于
70
%的序列同一性

[0793]
实施方案
308
包括如实施方案
279-306
中任一项所述的药物组合物,其中
p3与
cd3
具有小于
85
%的序列同一性

[0794]
实施方案
309
包括如实施方案
279-306
中任一项所述的药物组合物,其中
p3与
cd3
具有小于
90
%的序列同一性

[0795]
实施方案
310
包括如实施方案
279-306
中任一项所述的药物组合物,其中
p3与
cd3
具有小于
95
%的序列同一性

[0796]
实施方案
311
包括如实施方案
279-306
中任一项所述的药物组合物,其中
p3与
cd3
具有小于
98
%的序列同一性

[0797]
实施方案
312
包括如实施方案
279-306
中任一项所述的药物组合物,其中
p3与
cd3
具有小于
99
%的序列同一性

[0798]
实施方案
313
包括如实施方案
279-306
中任一项所述的药物组合物,其中
p3包含根据
seq id no:161(gsqclgpewevcpy)

seq id no:162(vycgpefdesvgcm)
的氨基酸序列

[0799]
实施方案
314
包括如实施方案
279-306
中任一项所述的药物组合物,其中
p3包含与
cd3
共享小于
10
%的序列同一性的全新氨基酸序列

[0800]
实施方案
315
包括如实施方案
280-314
中任一项所述的药物组合物,其中
p4削弱e与所述肿瘤抗原的结合

[0801]
实施方案
316
包括如实施方案
280-315
中任一项所述的药物组合物,其中
p4通过离子相互作用

静电相互作用

疏水相互作用

π
堆积相互作用和h键相互作用或其组合与e结合

[0802]
实施方案
317
包括如实施方案
280-316
中任一项所述的药物组合物,其中
p4在抗原结合位点处或附近与e结合

[0803]
实施方案
318
包括如实施方案
280-317
中任一项所述的药物组合物,其中当
l4
通过所述肿瘤特异性蛋白酶被切割时,
p4不再与e结合,从而将e暴露于所述肿瘤抗原

[0804]
实施方案
319
包括如实施方案
280-318
中任一项所述的药物组合物,其中
p4与所述肿瘤抗原具有小于
70
%的序列同一性

[0805]
实施方案
320
包括如实施方案
280-318
中任一项所述的药物组合物,其中
p4与所述肿瘤抗原具有小于
80
%的序列同一性

[0806]
实施方案
321
包括如实施方案
280-318
中任一项所述的药物组合物,其中
p4与所述肿瘤抗原具有小于
85
%的序列同一性

[0807]
实施方案
322
包括如实施方案
280-318
中任一项所述的药物组合物,其中
p4与所述肿瘤抗原具有小于
90
%的序列同一性

[0808]
实施方案
323
包括如实施方案
280-318
中任一项所述的药物组合物,其中
p4与所述肿瘤抗原具有小于
95
%的序列同一性

[0809]
实施方案
324
包括如实施方案
280-318
中任一项所述的药物组合物,其中
p4包含与所述肿瘤抗原共享小于
10
%的序列同一性的全新氨基酸序列

[0810]
实施方案
325
包括如实施方案
279-324
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含长度为至少5个氨基酸的肽序列

[0811]
实施方案
326
包括如实施方案
279-324
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含长度为至少6个氨基酸的肽序列

[0812]
实施方案
327
包括如实施方案
279-324
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含长度为至少
10
个氨基酸的肽序列

[0813]
实施方案
328
包括如实施方案
279-324
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含长度为至少
10
个氨基酸且长度不超过
20
个氨基酸的肽序列

[0814]
实施方案
329
包括如实施方案
279-328
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含长度为至少
16
个氨基酸的肽序列

[0815]
实施方案
330
包括如实施方案
279-329
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含长度不超过
40
个氨基酸的肽序列

[0816]
实施方案
331
包括如实施方案
279-330
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含至少两个半胱氨酸氨基酸残基

[0817]
实施方案
332
包括如实施方案
279-331
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含环状肽或线性肽

[0818]
实施方案
333
包括如实施方案
279-332
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含环状肽

[0819]
实施方案
334
包括如实施方案
279-332
中任一项所述的药物组合物,其中
p3或
p4包含线性肽

[0820]
实施方案
335
包括如实施方案
280-334
中任一项所述的药物组合物,其中
p4
包含根据
seq id no:163(pcrshidvakpicv)
的氨基酸序列

[0821]
实施方案
336
包括如实施方案
279-335
中任一项所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
egfr
,并且所述
t
细胞接合器包含
seq id no:164-178
的氨基酸序列

[0822]
实施方案
337
包括如实施方案
280-335
中任一项所述的药物组合物,其中
p4
包含根据
seq id no:179(svlfcvknlycwvt)、seq id no:180(vdfckiyswpvchq)、seq id no:181(idfcmlynwpicag)
的氨基酸序列

[0823]
实施方案
338
包括如实施方案
279-335
中任一项所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
trop2
,并且所述
t
细胞接合器包含
seq id no:182-219
的氨基酸序列

[0824]
实施方案
339
包括如实施方案
279-335
中任一项所述的药物组合物,其中所述肿瘤抗原包括
psma
,并且所述
t
细胞接合器包含
seq id no:220-231
的氨基酸序列

[0825]
实施方案
340
包括一种治疗有需要的对象的癌症的方法,所述方法包括向所述对象施用如实施方案
1-248
中任一项所述的多特异性抗体或如实施方案
249
所述的药物组合物

[0826]
实施方案
341
包括如实施方案
340
所述的方法,其中所述多特异性抗体诱导
t
细胞介导的对肿瘤细胞的细胞毒性

[0827]
实施方案
342