止血测量装置质量控制制剂的制作方法-尊龙凯时官方app下载

文档序号:36175640发布日期:2023-11-25 01:31阅读:95来源:国知局
止血测量装置质量控制制剂的制作方法
止血测量装置质量控制制剂
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求享有于
2021
年3月
31
日提交的美国临时申请号
63/168,838
的优先权,其公开内容通过引用全文并入本文

技术领域
3.本发明涉及用于测试粘弹性分析试剂功效的质量控制制剂以及制备这些制剂的方法



背景技术:

4.粘弹性分析对于评估各种医疗情况下的患者血液样品至关重要

因此,用于粘弹性分析的试剂在医院和临床实验室等情况下对于提供准确的结果是至关重要的

为了确保这些试剂提供准确且可靠的结果,重要的是在它们到达最终用户之前对其进行质量控制测试

5.目前用于执行粘弹性分析试剂的质量控制测试的制剂需要人供体,含有人血液

人血浆或从人血液中获得的成分,例如人红细胞

使用具有人供体来源血液成分的质量控制制剂相对昂贵,并且对供体构成感染风险

6.因此,存在对可靠的用于测试不含人供体来源血液成分的粘弹性分析试剂的质量控制制剂的需要

7.实施方案概述
8.根据本发明的一个实施方案,提供了一种制备制剂的方法,所述制剂用于测试至少一种粘弹性分析试剂的功效,所述制剂具有目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

目标人组织因子浓度和目标肝素浓度

所述方法包括:
a)
通过以下确定制剂的目标牛柠檬酸盐化血浆浓度:制备一个牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列,该牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列具有至少两个成员;测量牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一粘弹性特征,以获得牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值,所述第一粘弹性特征具有目标值;计算牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值的第一线性回归;和从第一线性回归外推对应于第一粘弹性特征目标值的预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度,所预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

所述方法还包括:
b)
通过以下确定制剂的目标人组织因子浓度:制备一个人组织因子稀释液系列,该人组织因子稀释液系列具有至少两个成员;测量人组织因子稀释液系列的每个成员的第二粘弹性特征,以获得人组织因子稀释液系列的每个成员的第二值,所述第二粘弹性特征具有目标值;计算人组织因子稀释液系列的每个成员的第二值的第二线性回归;和从第二线性回归外推对应于第二粘弹性特征目标值的预测的人组织因子浓度,所预测的人组织因子浓度是目标人组织因子浓度

所述方法还包括:
c)
通过以下确定制剂的目标肝素浓度:制备一个肝素稀释液系列,该肝素稀释液系列具有至少两个成员,测量肝素稀释液系列的每个成员的第三粘弹性特征,以获得肝素稀释液系列的每个成员的第三值,所述第三粘弹性特征具有目标值,计算肝素稀释液系列的每个
成员的第三值的第三线性回归;和从第三线性回归外推对应于第三粘弹性特征目标值的预测的肝素浓度,所预测的肝素浓度是目标肝素浓度

所述方法另外包括通过将牛柠檬酸盐化血浆

人组织因子和肝素组合在一起来制备制剂,使得所述制剂包含目标牛柠檬酸盐化血浆浓度的牛柠檬酸盐化血浆

目标人组织因子浓度的人组织因子以及目标肝素浓度的肝素

9.在一些实施方案中,步骤
b)

c)
可同时进行

10.在一些实施方案中,在步骤
(a)
中,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度与牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何另一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度不同,和牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度相同

在步骤
(b)
中,人组织因子稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,人组织因子稀释液系列的任何一个成员的人组织因子浓度与人组织因子稀释液系列的任何另一个成员的人组织因子浓度不同,人组织因子稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,人组织因子稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,和人组织因子稀释液系列的每个成员具有肝素浓度,人组织因子稀释液系列的每个成员的肝素浓度相同

在步骤
(c)
中,肝素稀释液系列的每个成员具有肝素浓度,肝素稀释液系列的任何一个成员的肝素浓度与肝素稀释液系列的任何另一个成员的肝素浓度不同,肝素稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,肝素稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,和肝素稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,肝素稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度是目标人组织因子浓度

11.在其它实施方案中,在步骤
(a)
中,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度与牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何另一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度不同,和牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度相同

在步骤
(c)
中,肝素稀释液系列的每个成员具有肝素浓度,肝素稀释液系列的任何一个成员的肝素浓度与肝素稀释液系列的任何另一个成员的肝素浓度不同,肝素稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,肝素稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,和肝素稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,肝素稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度相同

在步骤
(b)
中,人组织因子稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,人组织因子稀释液系列的任何一个成员的人组织因子浓度与人组织因子稀释液系列的任何另一个成员的人组织因子浓度不同,人组织因子稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,人组织因子稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,和人组织因子稀释液系列的每个成员具有肝素浓度,人组织因子稀释液系列的每个成员的肝素浓度是目标肝素浓度

12.根据本发明的另一实施方案,提供了一种制备制剂的方法,所述制剂用于测试至少一种粘弹性分析试剂的功效,所述制剂具有目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

目标人组织因子浓度和目标肝素浓度

所述方法包括:
a)
通过以下确定制剂的目标牛柠檬酸盐化血浆浓
度:测量牛柠檬酸盐化血浆稀释液的第一粘弹性特征,以获得牛柠檬酸盐化血浆稀释液的第一值,所述第一粘弹性特征具有目标值,和基于第一值并对应于第一粘弹性特征目标值确定预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度,所预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度;和
b)
通过以下确定制剂的目标人组织因子浓度:测量人组织因子稀释液的第二粘弹性特征,以获得人组织因子稀释液的第二值,所述第二粘弹性特征具有目标值,和基于第二值并对应于第二粘弹性特征目标值确定预测的人组织因子浓度,所预测的人组织因子浓度是目标人组织因子浓度;
c)
通过以下确定制剂的目标肝素浓度:测量肝素稀释液的第三粘弹性特征,以获得肝素稀释液的第三值,所述第三粘弹性特征具有目标值,和基于第三值并对应于第三粘弹性特征目标值确定预测的肝素浓度,所预测的肝素浓度是目标肝素浓度;和
d)
通过将牛柠檬酸盐化血浆

人组织因子和肝素组合在一起来制备制剂,使得所述制剂包含目标牛柠檬酸盐化血浆浓度的牛柠檬酸盐化血浆

目标人组织因子浓度的人组织因子以及目标肝素浓度的肝素

13.在一些实施方案中,步骤
b)

c)
可同时进行

14.根据本发明的另一实施方案,一种制备制剂的方法,所述制剂用于测试至少一种粘弹性分析试剂的功效,所述制剂具有目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

目标人组织因子浓度和目标肝素浓度

所述方法包括通过以下确定制剂的目标牛柠檬酸盐化血浆浓度:
a)
制备一个牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列,该牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列具有至少两个成员,测量牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一粘弹性特征,以获得牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值,所述第一粘弹性特征具有目标值,计算牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值的第一线性回归,和从第一线性回归外推对应于第一粘弹性特征目标值的预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度,所预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度;
b)
通过以下确定制剂的目标人组织因子浓度和目标肝素浓度:制备人组织因子稀释液组,该人组织因子稀释液组具有至少两个肝素稀释液系列,每个肝素稀释液系列具有至少两个成员,其中每个肝素稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度和肝素浓度,测量每个肝素稀释液系列的每个成员的第二粘弹性特征,以获得每个肝素稀释液系列的每个成员的第二值,所述第二粘弹性特征具有目标值,从人组织因子稀释液组鉴定具有比该人组织因子稀释液组中任何另一个成员更接近第二粘弹性特征目标值的测量的第二粘弹性特征的选定成员,该选定成员的人组织因子浓度是目标人组织因子浓度,并且该选定成员的肝素浓度是目标肝素浓度;和
c)
通过将牛柠檬酸盐化血浆

人组织因子和肝素组合在一起来制备制剂,使得所述制剂包含目标牛柠檬酸盐化血浆浓度的牛柠檬酸盐化血浆

目标人组织因子浓度的人组织因子以及目标肝素浓度的肝素

15.在一些实施方案中,在步骤
(a)
中,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度与牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何另一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度不同,和牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度相同

在步骤
(b)
中,每个肝素稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,每个肝素稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,任何一个肝素稀释液系列的人组织因子浓度与任何另一个肝素稀释液系列的人组织因子浓度不同,任何一个肝素稀释液系列的每个成员的人组织因子
浓度相同,和任何一个肝素稀释液系列的任何一个成员的肝素浓度与同一个肝素稀释液系列的任何另一个成员的肝素浓度不同

16.可以使用粘弹性分析装置测量第一

第二和
/
第三粘弹性特征

粘弹性分析装置可以是微流控盒

17.第一粘弹性特征可以是
ma
并且第一粘弹性特征目标值可以约为
63。
第二粘弹性特征可以是r并且第二粘弹性特征目标值可以约为
6。
第三粘弹性特征可以是r并且第三粘弹性特征目标值可以约为
6。
18.根据本发明的一个实施方案,一种制剂,所述制剂用于测试至少一种粘弹性分析试剂的功效,所述制剂包含
60-90
%的牛柠檬酸盐化血浆,
0.05-0.20
%的人组织因子,和
0.05-0.30u/ml
的肝素

19.在一些实施方案中,制剂可包含稳定剂

稳定剂可以是甘氨酸或
hepes
缓冲剂

制剂可包含防腐剂

防腐剂可以是叠氮化钠

制剂的
ph
可以为约
7.3
至约
7.9。
制剂的总蛋白含量可以大于约
6.4g/dl。
20.附图的简要说明
21.通过参考以下详述并参考附图,将更易理解上述实施方案的特征,其中:
22.图1示出了根据本发明实施方案在模拟
cacl2降解的条件下使用人供体血液获得的
teg global hemostasis
盒的结果

23.图2示出了根据本发明实施方案在模拟
cacl2降解的条件下使用本文所述的质量控制制剂获得的
teg global hemostasis
盒的结果

24.图3示出了根据本发明实施方案在模拟肝素酶降解的条件下使用本文所述的质量控制制剂获得的
teg global hemostasis
盒的结果

25.具体实施方案的详述
26.定义

在本说明书和随附的权利要求书中,除非上下文另有要求,否则以下术语应具有指示的含义:
27.在提到数值时,“约”是指所引用数值
±
10


[0028]“粘弹性分析”是指测量弹性固体
(
例如纤维蛋白固体
)
和流体的特征的任何分析方法

换句话说,粘弹性分析允许研究血液

血浆或血液样品等粘性流体的性质

在一些实施方案中,在模拟体内导致止血的条件的条件下进行粘弹性分析

例如,条件可以包括模拟体温的温度
(
例如,
37℃
的温度
)。
条件还可包括在模拟血管中的流速下凝块形成和溶解

粘弹性分析涵盖但不限于粘弹性测定和凝血测定,例如血栓弹力图
(thromboelastography

teg)、
血栓弹力测定
(thromboelastometry

tem)
以及使用微流控盒进行的测定,例如适合与
teg 6s hemostasis analyzer
系统一起使用的
teg global hemostasis
测定盒
(haemonetics,corp.,boston,ma)。
[0029]“粘弹性特征”、“参数”、“凝血测量”等是指通过粘弹性分析获得的测量,例如凝块形成的测量

该测量可以在凝块形成过程中的任何时间进行,包括但不限于纤维蛋白初始形成的时间或凝块达到一定强度的时间

[0030]
粘弹性特征或参数的一个非限制性实例是凝块起始时间
(“r”)
,即纤维蛋白初始形成的时间

粘弹性特征或参数的另一个非限制性实例是“ma”(
以毫米为单位的最大振幅
)
,它是纤维蛋白和血小板粘结的最大动态特性的直接函数,并表示纤维蛋白-血小板凝
块的极限强度

如果测试的血液成分的血小板功能降低,则
ma
仅代表基于纤维蛋白的凝块强度

可以对直接从受试者采集的血液成分

用凝血活化剂
(
如高岭土
)
处理的血液成分或用凝血抑制剂
(
如柠檬酸盐
)
处理并已通过添加钙适当逆转的血液成分测量粘弹性特征

[0031]“粘弹性分析装置”等是指可用于测量弹性固体和流体的粘弹性特征的设备或装置,例如,用于测量血液或血液成分形成凝块的能力的装置

微流控盒,例如适合与
teg 6s hemostasis analyzer
系统一起使用的
teg global hemostasis
测定盒
(haemonetics,corp.,boston,ma)
,是粘弹性分析的非限制性示例装置

[0032]“粘弹性分析试剂”等是指除血液或血浆测试样品之外,用于对测试样品进行粘弹性分析的任何化合物

粘弹性分析试剂的非限制性实例包括氯化钙
(cacl2)
以及肝素酶等生物分子

[0033]
本文所用的“目标值”等是指具体凝血测定的粘弹性特征或参数的值
(
或值的范围
)
,其是在对健康受试者的血液成分进行并且使用没有降解或在相当大的程度上失去其功效的粘弹性分析试剂的具体测定的优选值

[0034]
本文所用的“目标浓度”是指质量控制制剂中的组分的浓度,当在质量控制制剂中以该浓度存在时,经确定或预测以在使用没有降解或在相当大的程度上失去其功效的粘弹性分析试剂进行的具体测定的情况下取得该测定的目标值

[0035]
用于人血液粘弹性分析的质量控制试剂,包括含有此类试剂的装置,对于确保最终用户获得准确的粘弹性分析结果至关重要

粘弹性凝血测定利用氯化钙等试剂以及肝素酶等的各种生物分子

这些试剂会随着时间的推移而降解,导致使用它们所获得的结果不准确和不可靠

[0036]
目前用于测试这些试剂和含试剂的装置的质量控制制剂需要人供体,并且含有人血液

人血浆或从人血液中获得的成分,例如人红细胞

使用含有人供体来源血液成分的质量控制制剂相对昂贵,并且对供体构成感染风险

此外,使用人来源血液成分不太方便大规模生产

[0037]
用于测试粘弹性分析试剂的功效的本文所述的质量控制制剂不需要人供体来制造它们

在一些实施方案中,质量控制制剂含有柠檬酸盐化牛血浆

重组人组织因子和肝素
(
优选低分子量肝素
)。
在一些实施方案中,质量控制制剂还包含选自缓冲剂

稳定剂和防腐剂的至少一种额外组分

用于使用本文中描述的质量控制制剂的实施方案的说明在附录a中描述,附于此处并通过引用全文并入本文

[0038]
本文所述的粘弹性分析方法和测定利用含试剂的适合与
teg 6shemostasis analyzer
系统一起使用的
teg global hemostasis
测定盒

但是,本领域技术人员可以理解的是,也可使用不同的粘弹性分析方法和凝血测定并且使用不同的粘弹性分析装置应用本文所述的方法和制剂

[0039]
teg global hemostasis
测定盒
(“teg
盒”)
是柠檬酸盐化多通道微流控盒,其提供指示凝血因子

血小板和纤维蛋白原以及纤维蛋白溶解的功能测量的四种凝血测定

这四种测定包括(i)高岭土测定
(“ck”)
,它是一种内在活化测定,鉴定止血特征

出血风险和血栓形成;
(ii)
高岭土与肝素酶测定
(“ckh”)
,其消除了测试样品中肝素的作用,并与
ck
结合使用以评估系统性肝素或类肝素的存在;
(iii)rapidteg
tm
测定
(“crt”)
,其结合了高岭土和组织因子二者,它是一种内在和外在途径活化测定,能够更快地评估患者的止血特性;和
(iv)
功能性纤维蛋白原测定
(“cff”)
,它是一种外在途径活化测定,其使用
gp iib/iiia
血小板抑制剂来分离纤维蛋白对凝块强度的贡献,并且能够与
ck
一起使用以评估血小板和纤维蛋白原对总体凝块强度的相对贡献

[0040]
在一些实施方案中,本发明的质量控制制剂导致
ck r

ckh r
时间均延长表明
teg
盒上
cacl2的量
/
活性降低到该盒和同一批次的其他的盒不能再产生可靠结果的程度,因此不能再用于测试患者样品

[0041]
在一些实施方案中,在质量控制制剂中包括肝素以分开
ck r

ckh r。

ckh r
值增加至更紧密匹配
ck r
值时,这表明该盒上的肝素酶的量
/
活性降低到该盒和同一批次的其他的盒不能再产生可靠结果的程度,因此不能再用于测试患者样品

[0042]
在一些实施方案中,提供制备具有目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

目标人组织因子浓度和目标肝素浓度的质量控制制剂的方法,所述质量控制制剂用于测试至少一种粘弹性分析试剂的功效

[0043]
在一些实施方案中,该方法包括通过以下确定制剂的目标牛柠檬酸盐化血浆浓度:测量牛柠檬酸盐化血浆稀释液的第一粘弹性特征,以获得牛柠檬酸盐化血浆稀释液的第一值,所述第一粘弹性特征具有目标值

基于第一值并对应于第一粘弹性特征目标值确定预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度

所预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

[0044]
该方法还包括通过以下确定制剂的目标人组织因子浓度:测量人组织因子稀释液的第二粘弹性特征,以获得人组织因子稀释液第二值,所述第二粘弹性特征具有目标值

基于第二值并对应于第二粘弹性特征目标值确定预测的人组织因子浓度

所预测的人组织因子浓度是目标人组织因子浓度

[0045]
该方法还包括通过以下确定制剂的目标肝素浓度:测量肝素稀释液的第三粘弹性特征,以获得肝素稀释液的第三值,所述第三粘弹性特征具有目标值

基于第三值并对应于第三粘弹性特征目标值确定预测的肝素浓度

所预测的肝素浓度是目标肝素浓度

[0046]
然后通过将牛柠檬酸盐化血浆

人组织因子和肝素组合在一起来制备制剂,使得所述制剂包含目标牛柠檬酸盐化血浆浓度的牛柠檬酸盐化血浆

目标人组织因子浓度的人组织因子以及目标肝素浓度的肝素

[0047]
在一些实施方案中,该方法包括通过以下确定制剂的目标牛柠檬酸盐化血浆浓度:制备一个牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列,该牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列具有至少两个成员

测量牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一粘弹性特征,以获得牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值,所述第一粘弹性特征具有目标值

计算牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值的线性回归,和从该线性回归外推对应于第一粘弹性特征的目标值的预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度

所预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

[0048]
该方法还包括通过以下确定制剂的目标人组织因子浓度:制备一个人组织因子稀释液系列,该人组织因子稀释液系列具有至少两个成员

测量人组织因子稀释液系列的每个成员的第二粘弹性特征,以获得人组织因子稀释液系列的每个成员的第二值,所述第二粘弹性特征具有目标值

计算人组织因子稀释液系列的每个成员的第二值的线性回归,和从该线性回归外推对应于第二粘弹性特征目标值的目标值的预测的人组织因子浓度

所预
0.30u/ml
的肝素

[0059]
质量控制制剂还可包括本领域众所周知的一种或多种稳定剂,例如甘氨酸
、hepes
缓冲剂以及本领域众所周知的其它缓冲剂

[0060]
质量控制制剂还可包括本领域众所周知的一种或多种防腐剂,例如叠氮化钠

[0061]
在一些实施方案中,质量控制制剂的
ph
为约
7.3
至约
7.9。
制剂的总蛋白含量优选大于约
6.4g/dl。
实施例
[0062]
实施例1:制备质量控制制剂
[0063]
将来自一个批次的牛柠檬酸盐化血浆
(bcp)(3.8
%柠檬酸钠
)
的样品体积在水浴中解冻,水摸起来是温热的


500ml bcp
加入
5ml 1m hepes
缓冲盐水
(hbs)
,以获得
9.9mm
的最终
hepes
浓度

将所得溶液混合5分钟

[0064]
然后制备一个试验制剂系列,
bcp
的浓度发生改变并具有恒定浓度
(0.05

)

recombiplastin 2g(r2g)(
一种重组人组织因子
)。
使用
teg6s analyzer
上的
teg global hemostasis
盒对每个制剂进行粘弹性分析,数据显示在下表1中

[0065]
表1[0066][0067]
基于
ck ma
数据的线性回归,预测目标
bcp
浓度为
83.6
%,其对应于
ck
测定的粘弹性特征
(ma)
目标值
(63)。
[0068]
然后制备一系列的
r2g
稀释液
(
使用
r2g

25
% r2g
工作溶液
)

(
肝素
)
稀释液
(
使用
10u/ml
工作溶液
)
,使得最终
bcp
浓度为目标
bcp
浓度
(
上述的基于线性回归的约
83.6

)。
这些稀释液包括其它缓冲剂和稳定剂显示在表2中

[0069]
表2[0070]
[0071][0072]

1ml
的表2的每个
r2g/
稀释液等分至分开的玻璃小瓶中

将小瓶在
≤-35℃
冷冻并冻干样品

样品冻干后,用蒸馏去离子水复溶每个冻干
r2g/
稀释液

[0073]
使用
teg6s analyzer
上的
teg global hemostasis
盒对每个复溶的
r2g/
稀释液进行粘弹性分析

[0074]
从复溶的
r2g/
稀释液的粘弹性分析,确定了稀释液
#10(
其对应于
r2g
浓度为
0.075
%,浓度为
0.100u/ml)
所提供的表3中所示的
ck r
结果与
6.0
的标称
ck
测定r目标值最接近,同时还产生了落在表4所示的可接受范围内的另外的粘弹性分析结果

[0075]
表3[0076][0077]
表4[0078][0079][0080]
基于上述结果,选择具有目标
bcp
浓度约为
83.6


目标
r2g
浓度为
0.075
%和目标浓度为
0.100u/ml
的质量控制制剂进行制造过程

[0081]
实施例2:使用质量控制制剂
[0082]
本文所述的质量控制制剂可用于检测盒粘弹性分析试剂的降解

图1和图2显示了使用不同模拟
cacl2(
关键组分
)
降解水平的
teg
盒对本文所述的人供体血液样品和质量控制制剂样品的反应比较

很明显,质量控制制剂可以在
50
%检测
cacl2降解,而超过该水平,
ckh
通道上的r时间明显延长,并且
ck
通道上没有发生凝血

[0083]
如当模拟降解水平大于
90
%时
ckh r
值增加以匹配
ck k
值所证明的,质量控制制剂还可以检测
teg
盒上的肝素酶降解
(
参见图
3)。
[0084]
本发明的各种实施方案的特征在于在本段之后的段落
(
以及在本技术末尾提供的实际权利要求之前
)
中列出的潜在权利要求

这些潜在权利要求构成本技术书面说明的一部分

因此,在涉及本技术的后续程序中,或基于本技术要求优先权的任何申请中,下列潜在权利要求的主题可以作为实际权利要求提出

列入这种潜在权利要求不应被解释为实际权利要求不包括潜在权利要求的主题

因此,在后续程序中不提出这些潜在权利要求的决定不应被解释为向公众捐赠这些主题

[0085]
可要求保护的潜在主题
(
以字母“p”开头,以避免与下文提出的实际权利要求混淆
)
包括但不限于:
[0086]
p1.
一种制备制剂的方法,所述制剂用于测试至少一种粘弹性分析试剂的功效,所述制剂具有目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

目标人组织因子浓度和目标肝素浓度,所述方法包括:
[0087]
a)
通过以下确定制剂的目标牛柠檬酸盐化血浆浓度:
[0088]
i)
制备一个牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列,该牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列具有至少两个成员,
[0089]
ii)
测量牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一粘弹性特征,以获得牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值,所述第一粘弹性特征具有目标值,
[0090]
iii)
计算牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值的第一线性回归,和
[0091]
iv)
从第一线性回归外推对应于第一粘弹性特征目标值的预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度,所预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度;
[0092]
b)
通过以下确定制剂的目标人组织因子浓度:
[0093]
i)
制备一个人组织因子稀释液系列,该人组织因子稀释液系列具有至少两个成员,
[0094]
ii)
测量人组织因子稀释液系列的每个成员的第二粘弹性特征,以获得人组织因子稀释液系列的每个成员的第二值,所述第二粘弹性特征具有目标值,
[0095]
iii)
计算人组织因子稀释液系列的每个成员的第二值的第二线性回归,和
[0096]
iv)
从第二线性回归外推对应于第二粘弹性特征目标值的预测的人组织因子浓度,所预测的人组织因子浓度是目标人组织因子浓度;
[0097]
c)
通过以下确定制剂的目标肝素浓度:
[0098]
i)
制备一个肝素稀释液系列,该肝素稀释液系列具有至少两个成员,
[0099]
ii)
测量肝素稀释液系列的每个成员的第三粘弹性特征,以获得肝素稀释液系列的每个成员的第三值,所述第三粘弹性特征具有目标值,
[0100]
iii)
计算肝素稀释液系列的每个成员的第三值的第三线性回归,和
[0101]
iv)
从第三线性回归外推对应于第三粘弹性特征目标值的预测的肝素浓度,所预
测的肝素浓度是目标肝素浓度;和
[0102]
d)
通过将牛柠檬酸盐化血浆

人组织因子和肝素组合在一起来制备制剂,使得所述制剂包含目标牛柠檬酸盐化血浆浓度的牛柠檬酸盐化血浆

目标人组织因子浓度的人组织因子以及目标肝素浓度的肝素

[0103]
p2.
根据权利要求
p1
所述的制备制剂的方法,其中
[0104]
在步骤
(a)
中,
[0105]
牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度与牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何另一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度不同,和
[0106]
牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度相同;
[0107]
在步骤
(b)
中,
[0108]
人组织因子稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,人组织因子稀释液系列的任何一个成员的人组织因子浓度与人组织因子稀释液系列的任何另一个成员的人组织因子浓度不同,
[0109]
人组织因子稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,人组织因子稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,和
[0110]
人组织因子稀释液系列的每个成员具有肝素浓度,人组织因子稀释液系列的每个成员的肝素浓度相同;和
[0111]
在步骤
(c)
中,
[0112]
肝素稀释液系列的每个成员具有肝素浓度,肝素稀释液系列的任何一个成员的肝素浓度与肝素稀释液系列的任何另一个成员的肝素浓度不同,
[0113]
肝素稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,肝素稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,和
[0114]
肝素稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,肝素稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度是目标人组织因子浓度

[0115]
p3.
根据权利要求
p1
所述的制备制剂的方法,其中
[0116]
在步骤
(a)
中,
[0117]
牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度与牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何另一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度不同,和
[0118]
牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度相同;
[0119]
在步骤
(c)
中,
[0120]
肝素稀释液系列的每个成员具有肝素浓度,肝素稀释液系列的任何一个成员的肝素浓度与肝素稀释液系列的任何另一个成员的肝素浓度不同,
[0121]
肝素稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,肝素稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,和
[0122]
肝素稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,肝素稀释液系列的每个成员的
人组织因子浓度相同;和
[0123]
在步骤
(b)
中,
[0124]
人组织因子稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,人组织因子稀释液系列的任何一个成员的人组织因子浓度与人组织因子稀释液系列的任何另一个成员的人组织因子浓度不同,
[0125]
人组织因子稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,人组织因子稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,和
[0126]
人组织因子稀释液系列的每个成员具有肝素浓度,人组织因子稀释液系列的每个成员的肝素浓度是目标肝素浓度

[0127]
p4.
一种制备制剂的方法,所述制剂用于测试至少一种粘弹性分析试剂的功效,所述制剂具有目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

目标人组织因子浓度和目标肝素浓度,所述方法包括:
[0128]
a)
通过以下确定制剂的目标牛柠檬酸盐化血浆浓度:
[0129]
i)
测量牛柠檬酸盐化血浆稀释液的第一粘弹性特征,以获得牛柠檬酸盐化血浆稀释液的第一值,所述第一粘弹性特征具有目标值,和
[0130]
ii)
基于第一值并对应于第一粘弹性特征目标值确定预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度,所预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度;
[0131]
b)
通过以下确定制剂的目标人组织因子浓度:
[0132]
i)
测量人组织因子稀释液的第二粘弹性特征,以获得人组织因子稀释液的第二值,所述第二粘弹性特征具有目标值,和
[0133]
ii)
基于第二值并对应于第二粘弹性特征目标值确定预测的人组织因子浓度,所预测的人组织因子浓度是目标人组织因子浓度;
[0134]
c)
通过以下确定制剂的目标肝素浓度:
[0135]
i)
测量肝素稀释液的第三粘弹性特征,以获得肝素稀释液的第三值,所述第三粘弹性特征具有目标值,和
[0136]
ii)
基于第三值并对应于第三粘弹性特征目标值确定预测的肝素浓度,所预测的肝素浓度是目标肝素浓度;和
[0137]
d)
通过将牛柠檬酸盐化血浆

人组织因子和肝素组合在一起来制备制剂,使得所述制剂包含目标牛柠檬酸盐化血浆浓度的牛柠檬酸盐化血浆

目标人组织因子浓度的人组织因子以及目标肝素浓度的肝素

[0138]
p5.
一种制备制剂的方法,所述制剂用于测试至少一种粘弹性分析试剂的功效,所述制剂具有目标牛柠檬酸盐化血浆浓度

目标人组织因子浓度和目标肝素浓度,所述方法包括:
[0139]
a)
通过以下确定制剂的目标牛柠檬酸盐化血浆浓度:
[0140]
i)
制备一个牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列,该牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列具有至少两个成员,
[0141]
ii)
测量牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一粘弹性特征,以获得牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值,所述第一粘弹性特征具有目标值,
[0142]
iii)
计算牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的第一值的第一线性回归,和
[0143]
iv)
从第一线性回归外推对应于第一粘弹性特征目标值的预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度,所预测的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度;
[0144]
b)
通过以下确定制剂的目标人组织因子浓度和目标肝素浓度:
[0145]
i)
制备人组织因子稀释液组,该人组织因子稀释液组具有至少两个肝素稀释液系列,每个肝素稀释液系列具有至少两个成员,其中每个肝素稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度和肝素浓度,
[0146]
ii)
测量每个肝素稀释液系列的每个成员的第二粘弹性特征,以获得每个肝素稀释液系列的每个成员的第二值,所述第二粘弹性特征具有目标值,
[0147]
iii)
从人组织因子稀释液组鉴定具有比该人组织因子稀释液组中任何另一个成员更接近第二粘弹性特征目标值的测量的第二粘弹性特征的选定成员,该选定成员的人组织因子浓度是目标人组织因子浓度,并且该选定成员的肝素浓度是目标肝素浓度;和
[0148]
c)
通过将牛柠檬酸盐化血浆

人组织因子和肝素组合在一起来制备制剂,使得所述制剂包含目标牛柠檬酸盐化血浆浓度的牛柠檬酸盐化血浆

目标人组织因子浓度的人组织因子以及目标肝素浓度的肝素

[0149]
p6.
根据权利要求
p5
所述的制备制剂的方法,其中
[0150]
在步骤
(a)
中,
[0151]
牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度与牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的任何另一个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度不同,和
[0152]
牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员具有人组织因子浓度,牛柠檬酸盐化血浆稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度相同;
[0153]
在步骤
(b)
中,
[0154]
每个肝素稀释液系列的每个成员具有牛柠檬酸盐化血浆浓度,每个肝素稀释液系列的每个成员的牛柠檬酸盐化血浆浓度是目标牛柠檬酸盐化血浆浓度,
[0155]
任何一个肝素稀释液系列的人组织因子浓度与任何另一个肝素稀释液系列的人组织因子浓度不同,
[0156]
任何一个肝素稀释液系列的每个成员的人组织因子浓度相同,和
[0157]
任何一个肝素稀释液系列的任何一个成员的肝素浓度与同一个肝素稀释液系列的任何另一个成员的肝素浓度不同

[0158]
p7.
根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中使用粘弹性分析装置测量第一粘弹性特征

[0159]
p8.
根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中使用粘弹性分析装置测量第二粘弹性特征

[0160]
p9.
根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中使用粘弹性分析装置测量第三粘弹性特征

[0161]
p10.
根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中粘弹性分析装置是微流控盒

[0162]
p11.
根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中第一粘弹性特征是
ma。
[0163]
p12.
根据权利要求
p11
所述的方法,其中第一粘弹性特征目标值约为
63。
[0164]
p13.
根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中第二粘弹性特征是
r。
[0165]
p14.
根据权利要求
p13
所述的方法,其中第二粘弹性特征目标值约为
6。
[0166]
p15.
根据前述权利要求中任一项所述的方法,其中第三粘弹性特征是
r。
[0167]
p16.
根据权利要求
p15
所述的方法,其中第三粘弹性特征目标值约为
6。
[0168]
p17.
根据权利要求
p1

p4
之一所述的方法,其中步骤
(b)

(c)
同时进行

[0169]
p18.
一种制剂,所述制剂用于测试至少一种粘弹性分析试剂的功效,所述制剂包含:
[0170]
60-90
%的牛柠檬酸盐化血浆,
[0171]
0.05-0.20
%的人组织因子,和
[0172]
0.05-0.30u/ml
的肝素

[0173]
p19.
根据权利要求
p18
所述的制剂,其还包含稳定剂

[0174]
p20.
根据权利要求
p19
所述的制剂,其中稳定剂选自甘氨酸
、hepes
缓冲剂及其组合

[0175]
p21.
根据权利要求
p18-p20
中任一项所述的制剂,其还包含防腐剂

[0176]
p22.
根据权利要求
p21
所述的制剂,其中防腐剂是叠氮化钠

[0177]
p23.
根据权利要求
p18-p22
中任一项所述的制剂,其中制剂的
ph
为约
7.3
至约
7.9。
[0178]
p24.
根据权利要求
p18-p23
中任一项所述的制剂,其中制剂的总蛋白含量大于约
6.4g/dl。
[0179]
上述本发明的实施方案旨在仅作为示例性;许多变化和修改对于本领域技术人员来说是显而易见的

所有这些变化和修改旨在在任何所附权利要求中定义的本发明范围内

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